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[转贴]:液相方法学

液相色谱(LC)

  • 研究项目
    准确度 测量值与真实值接近的程度
    精密度 同一样品多次测量结果的重复程度
    线性范围 整个研究系统的性能在一个范围内良好
    检测限 S/N=3 从噪音的中间记峰高
    定量限 S/N=10
    噪音来源 短期 检测器噪音 泵脉动 积分系统电子噪音
    长期 外在因素 组分混合不均匀;温度波动;固定相流失(剃度);蓄积
    基线漂移 剃度洗脱;蓄积;检测器性能改变(UV灯老化;视差折光温度变化;流通池温度改变)
    峰面积 回收峰 对称峰为99.6-99.8%,不对称峰为92.3-97.8%
    峰高 对称性好的峰,用峰高定量和峰面积定性精度相同,但准确度更佳
    定量方法的确定 较好的定量方法
    改变实验条件 可能原因 变化参数 峰面积 峰高
    流动相/固定相 剃度/流动相分级,吸附活性的变化;固定相流失 K IS
    流速 泵不精确,流速改变 N IS
    柱效 柱床压缩,柱进口端强保留组分堆积;填料降解 N IS
    温度 不稳定 K IS
    峰形 化学反应造成的非高斯峰形;检测器响应慢;填料不均匀 IS IS
    样品体积 进样重复性差 Vs NO NO
    定量方法 面积归一法 每一次运行完毕后对所有有意义的峰进行积分。用于纯物质检查或降解化合物的相对含量

    外标矫正法 标准曲线法,超出范围可外推。
    内标矫正法 测定两个化合物的浓度-峰面积比例系数,及曲线比例系数。
    标准加入法 理想的矫正标准对照品加入空白中制备。在痕量分析中常用
    定量误差来源
    好的准确度
    样品具有代表性 取样技术,制备技术
    峰形重叠或干扰尽可能小
    好的峰形
    用纯标准品准确的矫正
    适宜的数据处理方法
    好的精度
    样品制备技术
    仪器重现性好,包括进样技术
    好的信噪比
    好的峰形
    适宜的数据处理方法
    定量及矫正方法
    痕量分析概要
    通过液液萃取或固体萃取有选择地分离被检出物
    通过挥发性溶剂浓缩样品
    选用高效(3微米,3.5微米*15色谱柱)
    用相对高浓度的被检测物,建立最佳分离条件,确保被检物与干扰组分有较好的分离度
    优化进样体积,在较高的范围内绘制峰高矫正曲线
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