药物分析教案第三节

省部重点实验室

2012/01/06

私聊

化学药检测

第三章药品质量标准分析方法验证

方法验证目的:证明采用的方法适合于相应检测要求.

1 研究新药时制定质量标准分析方法

2 药物生产方法变更、制剂组分变更、原分析方法修订

需验证的分析项目有:

1 鉴别试验.

2 原料药或制剂中有效成分含量测定.

3 杂质或制剂中其他成分（防腐剂等）的定量测定或限度检查.

4 药品溶出度、释放度等功能检查中,其溶出量的测定方法.

验证的内容有:

1.准确度 2.精密度

3.专属性 4.检测限

5.定量限 6.线性

7.范围 8.耐用性

一、精密度(precision):

一组测量值的彼此符合程度.用标准差SD或相对标准差RSD表示.

(1).重现性(reproducibility):指不同实验室中使用此种方法的精密度.

(2).中间精密度:指实验室内部的差异.如不同的时间,或同一实验室中不同分析者,或用不同的仪器进行测定的结果的变异程度.

(3).重复性(repeatability):指同一实验室短期内有同一分析者用同一仪器进行测定的结果的变异程度.

表示方法：

1.偏差:

（1）d=测定值-平均值

（2）相对偏差：

若两分平行操作：设AB两次测定值

（3）最大相对偏差：也称允许值

药品检验操作标准规定:

允许误差:容量分析≤0.3% ; 重量法≤0.5% ;

氧瓶燃烧法≤0.5% ; 仪器分析法≤3%

2.标准偏差(SD)

3.相对标准偏差(RSD)

二、准确度(accuracy):

测定结果与真实值的符合程度.用回收率表示.

回收率越接近100%越好,但若样品组分复杂,含量低,处理步骤多时,很难达到接近100%,更重要的是是否恒定.

要求测定高、中、低三个浓度,每个浓度测定三次,共9个数据进行评价.RSD应为2%以内.

三.检测限 (limit of detection ,LOD): 指分析方法能够从背景信号中区分出药物时,所需样品中药物的最低浓度,无需定量测定. LOD 是一种限度检验的效能指标,它既反映方法与仪器的灵敏度和噪音的大小, 也表明样品经处理后空白(本底)值的高低.

检测限的确定:

仪器分析时:

可用已知浓度的样品与空白试验对照,记录测得的被测药物信号强度S与噪音强度N,以能达到S/N≥2或S/N≥3(信噪比)时样品的最低浓度为检测限.

也可用多次空白试验来确定,方法为:

当空白值=0时:①测定背景10次以上,求出标准差б_b .②将б_b乘以三倍.③在工作曲线上求出相对应的浓度,即为方法的检测限.

当空白值≠0时:①测定背景10次以上,求出标准差б_b .②将б_b乘以三倍.③在工作曲线上求出相对应的浓度.④ 将求得对应浓度加上空白值即得方法的检测限.

非仪器分析时: 用已知浓度的样品分析来确定.

四.定量限(limit of quantitation ,LOQ): 指在保证具有一定可靠性(一定准确度和精密度)的前提下,分析方法能够测定出的样品中药物的最低浓度.

确定方法:仪器分析时用10б_b作为定量限的估计值.

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省部重点实验室

第1楼2012/01/06

五.选择性(selectivity):指在样品介质中有其他组分共存时该分析方法对共试物质准确而专属的测定能力.

专属性(specifity):一种方法仅对一种分析成分产生唯一信号.选择性则对多种化学成分产生不同响应,而主要成分的响应可与其他响应区分.

药物分析中考虑:杂质、降解产物、相关物质、制剂辅料.

生物药物分析中考虑:内源性物质的干扰,代谢产物的干扰,同时服药时的干扰.

六.线性和范围(linearity and range): 分析方法的线性就是供试物浓度的变化与试验结果(或测得的响应信号)呈线性关系.线性范围是指利用一种方法取得精密度和准确度均符合要求的试验结果,而且成线性的供试物浓度的变化范围.

可用作图法或计算回归方程来建立.

标准浓度应包括一定梯度的5-8个浓度,每个浓度值测定一次.标准曲线应覆盖样品可能的浓度范围,对于含量测定要求一般浓度上限为样品最高浓度的120%,下限为样品最低浓度的80%,但应高于LOQ. r≥0.9900

七.重现性(ruggedness): 指利用相同的方法在各种正常试验条件下对同一样品进行分析所得的重现程度.也就是不同实验室使用此分析方法的精密度.

八.耐用性(robusness):评价其保持不受参数微小变差影响的能力.

九.不同分析方法对验证参数的要求

验证项目	鉴别	杂检		溶出度释放度	含量测定	生物样品测定
验证项目	鉴别	定量	定性	溶出度释放度	含量测定	生物样品测定
精密度	-	-	-	+	+	+
准确度	-	+	-	-	+	+
检测限	-	-	+	-	-	+
定量限	-	+	-	-	-	+
选择性	+	+	+	-	+	+
线性和范围	-	+	-	-	+	+
重现性	-	+	-	-	+	+
耐用性	+	+	+	+	+	+

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tangtang

第3楼2012/01/07

内容很丰富，而且成系列，很好的讨论。

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青林

第4楼2012/01/08

允许误差:容量分析≤0.3% ; 重量法≤0.5% ;

氧瓶燃烧法≤0.5% ; 仪器分析法≤3%

看来仪器分析也不是很准吗？

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zhaohua8011

第5楼2012/01/08

不错的资料整理，建议上传WORD 版本易于大家下载！

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小虾米

第6楼2012/01/09

是啊，那现在又为什么要提倡用仪器分析？
青林(wyqql2060) 发表:允许误差:容量分析≤0.3% ; 重量法≤0.5% ;

氧瓶燃烧法≤0.5% ; 仪器分析法≤3%

看来仪器分析也不是很准吗？

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zhaozhao

第7楼2013/06/23

楼主有WORD 版本吗？

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xiaowang268

第8楼2013/06/23

这个做过的人基本都知道，但就是对于一些细节，比如该进几针还是不太懂得

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xiangever

第9楼2013/06/23

各有各的优缺点吧，仪器分析样品用量小，这在样品很金贵的时候作用很大，省不少银子呢；仪器分析数据具有可追溯性，这点化学检验就差了许多；还有，仪器分析使用范围较广，比如说HPLC就配备了各类检测器以适应不同样品的分析，但化学检验的话基于其检测原理还是有很多局限性的，比如测定重金属，只能测定总量，而IC或者配备了电化学检测器的HPLC就可以检测重金属的具体种类......
小虾米(wuxia330) 发表:是啊，那现在又为什么要提倡用仪器分析？