瘦肉精专题二：动物组织中盐酸克仑特罗等4 种β -激动剂（瘦肉精）药物的测定

wubin102628

2012/03/06

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样品前处理：

1、提取
将5 g 动物组织、15 mL 乙酸乙酯、3 mL 10% 碳酸钠溶液置于50 mL 离心管中，10000 rpm 下均质2 min。6000 rpm 下离心2 min，将上清液转入另一离心管中。用15 mL 乙酸乙酯重复提取残渣，合并乙酸乙酯。向乙酸乙酯提取液中加入5 mL 0.1 mol/L 的盐酸溶液，涡旋混合1 min，然后在6000 rpm 下离心1 min，收集下层水相。重复萃取一次，合并下层水相，用2.5 mol/L 氢氧化钠溶液调节pH 至5.2。

2、净化
a 活化：依次向ProElut PXC 60 mg/3 mL (Cat.#68203) 中加入3 mL 甲醇、3 mL 水和3 mL30 mmol/L 盐酸，流出液弃去；
b 上样：将提取液加入柱中*，流出液弃去；
c 淋洗：依次用3 mL 水、3 mL 甲醇淋洗，淋洗液弃去，并将小柱抽干；
d 洗脱：用5 mL 4% 氨水甲醇洗脱，收集洗脱液于具塞玻璃试管中，50 ºC 下氮气吹干
注：由于样品量大于柱管体积，应分次上样，或在PXC 柱上加12 mL 储液管(Cat.#4810)，适配器 (Cat.#4803)

3、衍生化
向上述盛有残渣的具塞玻璃试管中加入100 μL 甲苯和100 μL 双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA），涡旋振荡20 s，密封玻璃塞，置于80 ºC 恒温烘箱中加热1 小时，冷却后加入300 μL 甲苯，作为试样溶液，供GC/GC-MS 分析。

色谱条件：

进样口温度：220 ºC
进样方式：不分流
进样量：1 μL
程序升温：70 ºC (0.6min)，以25 ºC/min 升温至200 ºC (min)，以25 ºC/min 升温至280 ºC (5min)载气：He (>99.999%) 流速：0.9 mL/min
质谱条件
接口温度：280 ºC 溶剂延迟：8 min EI 温度：230 ºC 四极杆温度：160 ºC离子监测：定性离子：86、243、262、277 ；定量离子：86