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关于TQD ESI调谐的问题!急急急!

液质联用(LCMS)

  • 最近刚开始用TQD,基本啥也不太懂。按照说明书已经走到第四部分即ESI调谐,工程师说调谐液是要检测化合物的标准品溶液,我照做了,用的是小檗碱,然后到了intellistart setup parameters这个界面,compound name输入berberine,molecular mass/formula输入336,adductA+输入+,选择了create new sample tune,选择了develop MRM method,flow path选择combined(此处旁边有叹号),reservoir选择B,然后按start,结果会出现这么个massage:calibration file for the selected analysis is different to the calibration set in tune page .the calibration for the current analysis type will be loaded.我创建个新的调谐方法怎么还与什么不同呢?搞不懂。强行ok,结果就会再development图标上有个红色的叉,然后上面说没有找到化合物中336的母离子!郁闷至极!还请高手指点到底这个esi调谐应该如何进行啊?我上面填写和选择的参数哪个不对呢?急急急!
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  • Rubin07340

    第1楼2012/03/15

    你不需要选择create new sample tune,直接load 默认的或已经有的tune method 就可以了;还有你的调谐液浓度不要太低了,最好在
    100ppb以上,分子量336,母离子理论上是337左右,调出来的母离子可能与337稍有差别;调谐的时候你flow path 开始最好选
    infusion,流速可以在设为10μl或以上,一般是没问题的。还是不行的话,看你的仪器做其他已知质量的物质灵敏度有无变化,要是有变化的话,可能是你的质量轴需要校正;要是灵敏度无变化,再找其他方面原因。希望能解决了问题!

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  • happy爱米粒

    第2楼2012/03/16

    有点乱,能否上图片,看一下设置情况?楼上说的很有道理,调谐浓度最好在ppm级别,流速可适当提高至50-100

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  • leeandy

    第3楼2012/03/16

    我用的调谐液的浓度是1ppm,流速是20ul,工程师说intellistart的molecular mass写分子量而不是加成离子,也就是小檗碱的分子量336呗!还有仪器是新到的,实验室还没人用过呢,所以没有已经存在的tune method。而且不是每次测一个新样品的时候都要用该样品标准品做调谐液进行调谐么?
    点击intellistart出现一个对话框,按ok然后点击start

    等待过程中观察mass tune界面是
    结果等一会之后就出现下面的情况

    也不知道我说的您清不清楚!!实在是一点都不会啊!跟工程师也不能发图片啊!还请高手帮忙啊!

    liubin073400(liubin073400) 发表:你不需要选择create new sample tune,直接load 默认的或已经有的tune method 就可以了;还有你的调谐液浓度不要太低了,最好在
    100ppb以上,分子量336,母离子理论上是337左右,调出来的母离子可能与337稍有差别;调谐的时候你flow path 开始最好选
    infusion,流速可以在设为10μl或以上,一般是没问题的。还是不行的话,看你的仪器做其他已知质量的物质灵敏度有无变化,要是有变化的话,可能是你的质量轴需要校正;要是灵敏度无变化,再找其他方面原因。希望能解决了问题!

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  • leeandy

    第4楼2012/03/16

    看4楼我传上来的图片,不知道有没有说明白情况!还请指点啊!

    木有才(xgy2005) 发表:有点乱,能否上图片,看一下设置情况?楼上说的很有道理,调谐浓度最好在ppm级别,流速可适当提高至50-100

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  • 徐有才

    第5楼2012/03/16

    你参数有问题 小檗碱是季铵型生物碱啊 其正谱显示m/z就是336 按照你的设置m/z 337 当然找不到母离子了~~

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  • 徐有才

    第6楼2012/03/16

    你参数有问题 小檗碱是季铵型生物碱啊 其正谱显示m/z就是336 按照你的设置m/z 337 当然找不到母离子了~~你应该设 分子量335 就能找到母离子了~~~

    leeandy(leeandy) 发表:最近刚开始用TQD,基本啥也不太懂。按照说明书已经走到第四部分即ESI调谐,工程师说调谐液是要检测化合物的标准品溶液,我照做了,用的是小檗碱,然后到了intellistart setup parameters这个界面,compound name输入berberine,molecular mass/formula输入336,adductA+输入[M+H]+,选择了create new sample tune,选择了develop MRM method,flow path选择combined(此处旁边有叹号),reservoir选择B,然后按start,结果会出现这么个massage:calibration file for the selected analysis is different to the calibration set in tune page .the calibration for the current analysis type will be loaded.我创建个新的调谐方法怎么还与什么不同呢?搞不懂。强行ok,结果就会再development图标上有个红色的叉,然后上面说没有找到化合物中336的母离子!郁闷至极!还请高手指点到底这个esi调谐应该如何进行啊?

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  • happy爱米粒

    第7楼2012/03/16

    我用的调谐液的浓度是1ppm,流速是20ul,工程师说intellistart的molecular mass写分子量而不是加成离子,也就是小檗碱的分子量336呗!还有仪器是新到的,实验室还没人用过呢,所以没有已经存在的tune method。而且不是每次测一个新样品的时候都要用该样品标准品做调谐液进行调谐么?

    那请问分子量是平均还是最大丰度计算的结果?是336还是335请确认下哈。这个数值确实很重要,不要偏了才是。
    每做一个新方法的时候是要做离子源和四级杆参数调谐
    优化的,而且前提是要有质量轴校正文件。

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  • leeandy

    第8楼2012/03/16

    哦,好高深啊,那这个质量轴校正文件在哪里找啊,或者我要怎么创建呢?

    木有才(xgy2005) 发表:我用的调谐液的浓度是1ppm,流速是20ul,工程师说intellistart的molecular mass写分子量而不是加成离子,也就是小檗碱的分子量336呗!还有仪器是新到的,实验室还没人用过呢,所以没有已经存在的tune method。而且不是每次测一个新样品的时候都要用该样品标准品做调谐液进行调谐么?

    那请问分子量是平均还是最大丰度计算的结果?是336还是335请确认下哈。这个数值确实很重要,不要偏了才是。
    每做一个新方法的时候是要做离子源和四级杆参数调谐
    优化的,而且前提是要有质量轴校正文件。

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  • happy爱米粒

    第9楼2012/03/16

    新仪器安装时应该都做过质量轴校正,直接调用就可。仪器使用一段时间后四级杆质量轴可能会由于温度或其他原因发生偏离,需要用标准液校正质量数。随机应该配有碘化钠铯或类似的标液。

    一般不用刻意调出,都是默认的当前最新的校正文件,除非当前的不是可用的,才需要调用之前的。

    leeandy(leeandy) 发表:哦,好高深啊,那这个质量轴校正文件在哪里找啊,或者我要怎么创建呢?

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  • 徐有才

    第10楼2012/03/16

    这样操作是可以的 小檗碱 C20H18N O4+ A:336.1230 100% A+1: 337.1264 22.05% A+2:338.1291 3.03%

    木有才(xgy2005) 发表:我用的调谐液的浓度是1ppm,流速是20ul,工程师说intellistart的molecular mass写分子量而不是加成离子,也就是小檗碱的分子量336呗!还有仪器是新到的,实验室还没人用过呢,所以没有已经存在的tune method。而且不是每次测一个新样品的时候都要用该样品标准品做调谐液进行调谐么?

    那请问分子量是平均还是最大丰度计算的结果?是336还是335请确认下哈。这个数值确实很重要,不要偏了才是。
    每做一个新方法的时候是要做离子源和四级杆参数调谐
    优化的,而且前提是要有质量轴校正文件。

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