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差点就能分开的峰如何优化?请各位大大一块出出主意(续)

液相色谱(LC)

  • 碱性三乙胺流动相在听取大家建议微调过后已能基本分开,但考虑到后处理我又想尝试乙酸的酸性流动相了。在抱着试一试心态下走了一针后没想到也能跑出来,只不过有机相比例高的离谱需要95以上的乙腈或甲醇才能出来 啧啧
    流动相条件:除波长有变化外,都是使用的4.6*250mm 5um的依利特柱子 温度30度,
    详见图片第一张是 乙腈-三乙胺水溶液=30-70 再走梯度跑出

    第2张是乙腈-乙酸水溶液=98-2等度跑出

    最后两张依次是甲醇-乙酸水溶液 甲醇95-100梯度和90-100梯度跑出
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  • 有水有渝

    第1楼2012/04/01

    应助达人

    楼主准备是每个峰都要,还是只要其中的几个主成分峰,最好能说明哪些峰是需要的,为什么后面两图的基线是向下走的,如果峰都要,我倾向于选择甲醇-乙酸水溶液 甲醇90-100梯度跑出的,在此基础上改进。有三氟乙酸的话也可以试试。

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  • 振奋号

    第3楼2012/04/01

    主要是想要20分钟后的那几个 甲醇的出峰好慢说而且峰型跟前面的图有变化 我都怀疑甲醇有没有全洗出来 呵呵

    有水有渝(xky0230699) 发表:楼主准备是每个峰都要,还是只要其中的几个主成分峰,最好能说明哪些峰是需要的,为什么后面两图的基线是向下走的,如果峰都要,我倾向于选择甲醇-乙酸水溶液 甲醇90-100梯度跑出的,在此基础上改进。有三氟乙酸的话也可以试试。

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  • pilipala

    第4楼2012/04/02

    可以尝试:
    1。甲醇换乙腈
    2。乙酸换TFA,0.05%或者0.1%

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  • 振奋号

    第5楼2012/04/05

    好的 谢谢!

    pilipala(pilipala) 发表:可以尝试:
    1。甲醇换乙腈
    2。乙酸换TFA,0.05%或者0.1%

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  • 振奋号

    第6楼2012/04/16

    果然其他条件还是次要的柱子选对是关键。 同类型的C18柱填料太好吸附太强,没想到纯乙腈都洗不下来了说。不过换了C8柱好多了 但是才跑了一天,第二天预柱就堵了。。。 后来又跑了一针没苯基预柱的,结果峰面积小多了,感觉可能出现部分死吸附了吧?C8柱子跑的图 【流动相乙腈-乙酸水】主峰是前伸峰 个人觉得是溶解样品溶剂是乙酸乙酯所以会前伸,浓度过高也有可能吧我倒 好一阵子没来 差点忘了怎么上传图片。。。。明天拿粗品过下正相柱看看,希望有好的惊喜~

    有水有渝(xky0230699) 发表:楼主准备是每个峰都要,还是只要其中的几个主成分峰,最好能说明哪些峰是需要的,为什么后面两图的基线是向下走的,如果峰都要,我倾向于选择甲醇-乙酸水溶液 甲醇90-100梯度跑出的,在此基础上改进。有三氟乙酸的话也可以试试。

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  • 振奋号

    第7楼2012/04/16

    好奇问下TFA效果会更好吗?新手勿喷呀~

    pilipala(pilipala) 发表:可以尝试:
    1。甲醇换乙腈
    2。乙酸换TFA,0.05%或者0.1%

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