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应用蒸发光散射检测器进行抗生素药品质量分析的工作体会

  • 省部重点实验室
    2012/04/16
  • 私聊

兽药/抗生素检测

  • 2005年版药典起草时,我室承担了硫酸阿米卡星系列产品的质量标准起草工作。按中检所的统一部署,氨基糖苷类产品拟采用蒸发光散射检测器进行含量测定和有关物质检查。我所在方法建立的过程中对蒸发光散射检测器的使用有了一些体会,现予以整理,抛砖引玉,请各兄弟单位对该检测器的使用发表高见。

    2、流动相的组成和流速对检测的影响

    蒸发光散射检测器是通过检测散射光强度来对被分析物进行检测的。根据米氏散射理论,散射光强度与进入光散射池的粒子直径呈正比,而该粒子的直径又与雾化形成的液滴直径呈正比。因此,在柱后流出物进入雾化器后,应尽可能使其形成更大直径的液滴。文献报道,液滴直径与柱后流出物的表面张力、粘度以及柱后流出物与载气的流速比呈正比。




    根据以上理论,有必要优化流动相的成分组成,提高其表面张力和粘度,此外在载气流速一定的情况下,适当增加流动相的流速均有利于提高最终的检测灵敏度。



    在实际的方法开发中,流动相的成分组成又不能仅仅只考虑形成较大的液滴直径。为了使绝大多数的酸碱化合物获得良好的分离效果,通常都需要在流动相中添加缓冲盐。缓冲盐应具有较好的挥发性和较高的纯度,常用甲酸、乙酸、三氟醋酸、乙酸铵等。此外,在载气流速一定的情况下,提高流动相的流速虽有利于增加液滴直径,但同时也会引起基线的波动,因此,实际使用时应注意各种因素的相互影响,以获取最大的灵敏度。

    3、漂移管的温度对检测的影响

    文献报道,在流动相流速一定的情况下,温度对检测器基线水平和噪音的影响并没有明显的规律性。当漂移管温度较低时,柱后流出物形成的液滴无法完全蒸发,大量粒子进入光散射池,此时基线水平高,一般不利于检测。随着温度的增加,液滴蒸发的效率提高,基线水平逐渐降低,直至达到检测的要求。由于流动相中通常都含有一定量的缓冲盐,因此一般都需要相对较高的蒸发温度。但是并不意味着温度越高越好,过高的温度会导致噪音增加,还有可能使部分被测成分(主要是半挥发成分)损失,降低信噪比。




    在方法开发时,比较了不同温度对检测结果的影响。实验发现,用SEDEX75检测器,流速为1.0ml/min时,按供应商推荐的漂移管温度40℃检测,此时峰响应最大,但基线水平高,不利于有关物质的检查,当温度达到50℃时,虽然峰响应有10%左右的损失,但基线水平低,灵敏度最大。
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  • 省部重点实验室

    第1楼2012/04/16

    应用蒸发光散射检测器进行抗生素药品质量分析的工作体会-4、载气流速对检测的影响

    文献报道,在漂移管温度一定的情况下,载气流速对峰响应的影响有一定的规律性。一般而言,较小的载气流速能获得较大粒径的粒子,有利于提高散射光的强度从而提高峰响应。但是流速过低,柱后流出物的雾化不完全,从而会使基线水平升高,噪音加大,反而不利于检测。当载气流速较大时,由于雾化完全,基线水平较低,但此时形成的粒子直径较小,峰响应降低。




    在方法开发时,比较了载气流速对检测结果的影响。实验发现,用SEDEX75检测器,漂移管温度为50℃时,设置载气压力分别为2.5bar、3.5bar和4.0bar。结果载气压力为2.5bar时,基线噪音很大,无法检测;4.0bar时,基线最为平稳,但1mg/ml浓度的阿米卡星溶液进样20μl峰面积不足2000。因此,选择3.5bar的载气流速最为适宜。

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  • lxb20080532

    第2楼2013/07/20

    很专业啊,学习学习在学习。

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  • 树下听风吹

    第3楼2013/07/25

    学习了,很不错的经验总结。

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  • 你说晕不晕

    第4楼2013/10/17

    请问下,用蒸散能做到多大的检测限?

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  • xndxlzm

    第5楼2013/10/18

    应助达人

    还没使用过,学习一下

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  • 红茶咖啡

    第6楼2014/01/19

    学习了 ,支持

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