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梯度洗脱柱平衡的一些疑问

液相色谱(LC)

  • 实验用到梯度洗脱,A:40mM磷酸盐缓冲溶液 B:乙腈:甲醇:水(45:45:10)

    时间(min)

    B(%)

    0

    0

    1.9

    0

    18.1

    57

    18.6

    100

    22.3

    100

    23.2

    0

    26

    0


    请教大家:梯度之前的平衡,要用哪一相平衡柱子?还是要运行几个空白梯度进行平衡?
    我用的是A相,直至压力和基线稳了才进行梯度分析,这样对吗?
    关于梯度洗脱柱平衡的注意事项请大家多指教一下。
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  • zhaohua8011

    第1楼2012/04/18

    不需要,用开始的梯度比例平衡即可!

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  • minus213

    第2楼2012/04/18

    能按照我的梯度说明白一点吗?

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  • 有水有渝

    第3楼2012/04/18

    应助达人

    B(%) 0来平衡,最好是先做一个空白梯度。

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  • jgslhq

    第4楼2012/04/19

    我看你的梯度很容易析盐啊。。。
    18.1到18.6,用0.5min就将有机相比例调这么高,而且盐浓度也挺大。楼主还是用缓一点的梯度升上去

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  • rc-angman

    第5楼2012/04/26

    楼主的C18柱子是耐水相的吗?还是用的SCX柱子?纯缓冲盐流动相对C18柱子的话不怎么样吧

    梯度平衡柱子都是用初始比例平衡的。比如说你进完一个样品之后,最好要用初始比例的流动相平衡一段时间柱子。否则因为流动相未恢复到原始比例,极性和前一次有差别,致使流动相洗脱能力变化,所要的峰保留时间就会不同了

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  • juegen

    第6楼2012/08/11

    梯度平衡柱子都是用初始比例平衡的。比如说你进完一个样品之后,最好要用初始比例的流动相平衡一段时间柱子。否则因为流动相未恢复到原始比例,极性和前一次有差别,致使流动相洗脱能力变化,所要的峰保留时间就会不同了

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  • lkyitao

    第7楼2012/08/16

    梯度洗脱前走个空白梯度,平衡有初始浓度

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  • yuechunguang

    第8楼2015/01/20

    就是走一个空白样,是这样的吗?

    梯度洗脱程序如何平衡柱子?

    lkyitao(lkyitao) 发表:梯度洗脱前走个空白梯度,平衡有初始浓度

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  • hujiangtao

    第9楼2015/01/21

    应助达人

    初始流动相多平衡一会儿

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  • 夏天的雪

    第10楼2015/01/21

    应助达人

    可以在梯度程序的最后部分将流动相比例回到初始流动相,例如本例中最后23.2min到26min就是在平衡色谱柱

    yuechunguang(yuechunguang) 发表:就是走一个空白样,是这样的吗?

    梯度洗脱程序如何平衡柱子?

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