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新柱柱压高,冲不下来

液相色谱(LC)

  • 新买的迪马C18柱测定生物样本,使用不到一个月,岛津的色谱仪,有预柱;
    有一次使用磷酸二氢钾的缓冲液(PH3.0):乙腈(85:15)作为流动相,流速从0.2ml/min直接升到了1,压力突然升高,立即停泵,用乙腈-水(10:90)冲洗,压力降下来后,就梯度冲柱过夜(乙腈比例由10%到90%),第二天把水相比例调大以后,压力又升高了,
    已经试过用90%水-乙腈,90%水-甲醇,纯乙腈,纯甲醇冲洗,柱压都没降下来;
    发现用0.2%的醋酸水溶液做水相的时候,压力下降2-3MPa,但换成水以后,又会有上升趋势,
    到底是缓冲盐析出了,还是别的东西堵了啊,为什么我冲了这么久,柱压还是不降啊;各位大侠救命啊~~~
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  • tangtang

    第1楼2012/05/15

    一般先堵预柱,拆掉预柱看看?

    PS:重复发帖会被删除的。

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  • drugmen

    第2楼2012/05/15

    磷酸二氢钾的缓冲液(PH3.0):乙腈(15:85)作为流动相


    有机相比例过高了,缓冲盐当然会析出。

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  • drugmen

    第3楼2012/05/15

    梯度冲柱过夜(乙腈比例由10%到90%)

    具体是如何设定的?比例变化过快,就还是有可能会有缓冲盐析出。

    冲柱压力就变高,还是进样以后柱压变高?

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  • duyumeng

    第4楼2012/05/16

    哦,不好意思,我不知道我重复发帖了,可能是操作的问题

    tangtang(tangtang) 发表:一般先堵预柱,拆掉预柱看看?

    PS:重复发帖会被删除的。

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  • duyumeng

    第5楼2012/05/16

    不好意思,我写错了,是乙腈的比例是15%

    drugmen(drugmen) 发表:磷酸二氢钾的缓冲液(PH3.0):乙腈(15:85)作为流动相

    有机相比例过高了,缓冲盐当然会析出。

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  • duyumeng

    第6楼2012/05/16

    好像是10%,30%,60%,90%各冲了30-60min不等,我冲了柱子就走了,等第二天早晨回来,把流动相换成15%的乙腈的时候,压力就上升了

    drugmen(drugmen) 发表:梯度冲柱过夜(乙腈比例由10%到90%)

    具体是如何设定的?比例变化过快,就还是有可能会有缓冲盐析出。

    冲柱压力就变高,还是进样以后柱压变高?

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  • duyumeng

    第7楼2012/05/16

    我已经换了新的柱芯,柱套也超声了,还是这么高

    tangtang(tangtang) 发表:一般先堵预柱,拆掉预柱看看?

    PS:重复发帖会被删除的。

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  • zhaohua8011

    第8楼2012/05/16

    流动相过滤看看,再则换根柱子验证一下!

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  • houjjun

    第9楼2012/05/16

    色谱柱可能是堵了

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  • houjjun

    第10楼2012/05/16

    先用纯水冲一下吧,然后再用有机相,再用纯水和有机相,再用缓冲盐

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