仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
2
收藏
点赞
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
生命科学仪器
>
生命科学仪器综合讨论
>
帖子详情
微生物鉴定中常用的生化反应
省部重点实验室
2012/06/12
私聊
生命科学仪器综合讨论
实验原理
有些细菌具有合成淀粉酶的能力,可以分泌胞外淀粉酶。淀粉酶可以使淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖,淀粉水解后遇碘不再变蓝色。
细菌产生的脂肪酶能分解培养基中的脂肪生成甘油及脂肪酸。脂肪酸可以使培养基pH下降,可通过在油脂培养基中加入中性红做指示剂进行测试。中性红指示范围为pH6.8(红)~8.0(黄)。当细菌分解脂肪产生脂肪酸时,则菌落周围培养基中出现红色斑点。
某些细菌分泌蛋白酶分解明胶,产生小分子物质。如果细菌具有分解明胶的能力,则培养基可由原来固体状态变成液体状态。
牛乳中主要含有乳糖、酪蛋白等成分。细菌对牛乳的利用主要是指对乳糖及酪蛋白的分解和利用。牛乳中常加入石蕊作为酸碱指示剂和氧化还原指示剂。石蕊中性时呈淡紫色,酸性时呈红色,碱性时呈蓝色,还原时则部分或全部脱色。细菌对牛乳的利用可分三种情况:
(1)酸凝固作用:细菌发酵乳糖后,产生许多酸,使石蕊牛乳变红,当酸度很高时,可使牛乳凝固,此称为酸凝固。
(2)凝乳酶凝固作用:某些细菌能分泌凝乳酶,使牛乳中的酪蛋白凝固,这种凝固在中性环境中发生。通常这种细菌还具有水解蛋白质的能力,因而产生氨等碱性物质,使石蕊变蓝。
(3)胨化作用:酪蛋白被水解,使牛乳变成清亮透明的液体。胨化作用可以在酸性条件下或碱性条件下进行,一般石蕊色素被还原褪色。
实验材料
1、活材料:大肠杆菌(E. coli)、枯草杆菌(Bacillus subtilis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)、黏乳产碱杆菌(Alcaligenes viscolactis)、铜绿假单胞菌(Psudomonas aeruginosa)、普通变形杆菌(Proteus vularis )。
2、培养基:淀粉培养基:牛肉膏蛋白胨培养基加0.2%的可溶性淀粉;油脂培养基:牛肉膏蛋白胨培养基加花生油10mL、0.6%中性红水溶液1mL;明胶液化培养基:蛋白胨5g,明胶100~150g,水1000mL, pH7.2~7.4,115℃灭菌20min。石蕊牛乳培养基:牛奶粉100g、石蕊0.075g、水1000 mL、pH6.8,121℃灭菌15 min 。
3、试剂:卢哥氏碘液。
实验用品
平皿、接种环、酒精灯、试管、接种针等。
实验方法
(一)淀粉水解试验
1、准备淀粉培养基平板:将熔化后冷却至50℃左右的淀粉培养基倒入无菌平皿中,待凝固后制成平板。
2、接种:用记号笔在平板底部划成两部分,在每部分分别写上菌名,用接种环取少量的待测菌,点接在培养基表面的相对应部分的中心,其中一个菌种应是枯草杆菌做对照菌。★你能解释原因吗?
3、培养:将接种后的平皿置于28℃恒温箱培养24h。
4、检测:取出平板,打开平皿盖,滴加少量的碘液于平板上,轻轻旋转,使碘液均匀铺满整个平板。菌落周围如出现无色透明圈,则说明淀粉已经被水解,表示该细菌具有分解淀粉的能力。可以用透明圈大小说明测试菌株水解淀粉能力的强弱。
(二)油脂水解试验
1、将装有油脂培养基的三角瓶置于沸水浴中熔化,取出并充分振荡,使油脂均匀分布,再倾入无菌平皿中,待凝固成平板。
2、接种:于同一平皿的两边接种,其中一种是金黄色葡萄球菌作为对照菌。置于37℃恒温箱培养24h,取出后观察平板菌苔颜色,如果出现红色斑点,即说明脂肪被水解了,此反应为正反应。红色斑点大小说明测试菌株水解脂肪能力的强弱。
(三)明胶液化试验
1、接种:用穿刺接种法接种大肠杆菌或产气肠杆菌于明胶培养基中。
2、培养:放20℃恒温箱中培养48h。若细菌在20℃下不长,则应放在最适温度下培养。
3、观察结果:观察培养基有无液化情况及液化后的形状。
因明胶在低于20℃时凝固,高于25℃时自行液化,若是在高于20℃下培养的细菌,观察时应放在冰浴中观察,若明胶被细菌液化,即使在低温下明胶也不会再凝固。
(四)石蕊牛乳试验
1、接种:将黏乳产碱杆菌和铜绿假单胞菌接种入石蕊牛乳培养基中。
2、培养:将接种后的试管于37℃恒温培养7d,另外保留一支不接种的石蕊牛乳培养基作为对照。
3、结果观察:取出培养物,以不接种任何细菌的试管为对照,观察接种不同细菌生长后的变化情况。
分
该帖子已被
版主-zhang8826857
加3积分,加2经验;加分理由:欢迎常来生命科学仪器板块交流^_^
相关话题
1
五颜六色的采血管
2
人用肝素化采血管的质量控制
3
生气与疝气有关吗
4
硅胶假体-乳房植入物的安全性
5
分光光度计标准操作规程(SOP)
+关注
私聊
容百川
第1楼
2012/06/16
最近听到最多的是C反应蛋白。
0
发表回复
+关注
私聊
省部重点实验室
第2楼
2012/06/17
您是搞蛋白的吗
容百川(jjwws)
发表:
最近听到最多的是C反应蛋白。
0
发表回复
近期热榜
一句话说说参加原创大赛对您的影响和帮助
油罐混装,这样的食用油你还敢吃吗?
色谱耗材品限时大促,火热进行中!
色谱耗材品限时大促,火热进行中!
热门活动
“食”字路口不容走错!混装油事件何去何从?
罐车运输食用油乱象:如何护航食用油安全?
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
科学家完成人类脑白质微观结构图集
分享
2012/10/22
【原创】关于微生物采样器
2011/04/12
【求助】求助SUNRISE酶标仪的工作站软件
2007/11/25
【讨论】关于海洋科学
2006/10/26
中国玉米新品种!指纹库建立系列研究!
第六届原创
2012/09/10
RNAi实验原理与方法选择
分享
2012/10/15
【讨论】请上月本版发帖前五的用户前来领奖
2008/10/01
【求助】小鼠单克隆抗体等电点是多少?
2010/07/06
【我们不一YOUNG】第一次做生物实验
原创
2024/07/08
【我们不一YOUNG】蛋白质浓度测定方法大全
原创
2024/07/06
【我们不一YOUNG】HTS酶抑制剂筛选的流程介绍
分享
2024/07/05
太空微重力环境下癌症药物研究系统进口航空航天随机定位微重力模拟仪AJ001X
分享
2024/07/05
弱光成像或体内发光实验Atik TE科研制冷CCD相机
原创
2024/07/05
【我们不一YOUNG】结缘仪器,一起结缘,与仪器信息网一起成长
原创
2024/07/01
心血管检测仪打开后出现ch375dll.dll电脑丢失怎么办
已应助
2024/07/01
出售贝克曼DXC800生化分析系统
原创
2024/06/21
‘有奖问答’对错题’:用抽样方案(30,0)对产品批进行连续验收,当批不合格品率为1%时,方案的接收概率为73.97%,则平均检出质量为( )。
讨论
2024/07/05
关于发布CNAS-CL01-G001:2024《检测和校准实验室能力认可准则的应用要求》及其过渡政策的通知
分享
2024/07/04
顶空HS-20如何实现不进样仅记录基线
求助
2024/07/09
‘有奖问答’对错题’:OC曲线可以用来( )。
讨论
2024/07/10
CNAS:CL01-G001变更
求助
2024/07/05
多人主检的报告,检测审核应该怎么签字
求助
2024/07/05
安捷伦定性软件得色谱图
求助
2024/07/10
17657-2013 1m3甲醛气候箱法问题
求助
2024/07/10
关于胶囊与明胶中铬的测量要说的话--200批样品测试的经验
转帖
2012/06/12
请问实验室评审会问技术负责人什么问题??越具体越好啊,谢谢
原创
2012/06/12
中国修改专利法 允许复制“救命药”
分享
2012/06/12
美汁源饮料瓶盖存卫生隐患 消费者惊呼不再买
分享
2012/06/12
来伊份、百味林 被曝添加剂超标
分享
2012/06/12
检测试验室马上要评审,请问会问技术负责人一些舍呢么问题?具体的才好
求助
2012/06/12
医药制造:生物生化制品表现最佳 化学类最差
讨论
2012/06/12
【讨论】甲酸甲酯 甲酸乙酯
2012/06/12
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...