水相GPC更换流动相需要多久的平衡时间？

实验室有GPC在运行，但没有做过。设想一下。可否：

先以0.1 M NaNO3洗柱子，直至基线平稳，然后以一定的梯度过渡，最后100%0.3 M NaCl；

另外一种可能做法：第一种buffer平衡后，直接以第二种buffer，洗柱子。

估计提高流速，过夜，时间应该足够了。

有机相到水相1天左右就可以换过来了，水相只是盐的种类不同，如果用测试流速走，一晚上足够。

应助达人

不明白楼主为啥要把硝酸钠更换成氯化钠？氯离子对色谱不好的呀，只是盐的切换，比较快的，要不了2小时就应该平衡了，除非你的实验室条件不好，比如温湿不好。

应助达人

有机相和水相的切换时间要长一点，如果是有机相不溶于水需要时间会更长一些，但有机相到水还是比较容易，就算有一点有机溶剂干扰比较小。但是水相岛有机相的时间会更长一些，有水分的话，对有些有机相的分析影响就会很大。

我后来是从0.1 M NaNO3换到了0.1 M phosphate buffer (pH 7.2) + 0.3 M NaCl的流动相。端午节前换好，端午节后过来就可以用了。流速设置为0.1 mL/min，远远低于测试速度1 mL/min。

从硝酸钠换成氯化钠，是因为在标准样测试报告中，使用的是氯化钠而非硝酸钠。
目前的实验室条件还是很不错的，在以 1 mL/min测试的时候，大约40分钟就可以把所有样品跑出来，是不是在表明1个小时内，溶剂就可以从流动相瓶子流到废液瓶了呢？你说的2个小时平衡时间，是不是说明新的流动相把老的流动相“赶出来”就可以了呢？

再请问一下，为什么氯离子对色谱不好呀？我发现更换好新的流动相后，柱压由1012 psi增加到了1082psi，会不是是氯离子的影响呢？

真是非常感谢你的详解。太感动了

应助达人

氯离子对不锈钢管道不好，易被腐蚀。你用0.1M的硝酸钠换成0.3M的氯化钠，盐的浓度增大了，压力可能会有变化。
冲洗置换流动相一个是要看你管路中流动相的多少和流速，洗脱体积一般要是整个管路流动相的体积的2-3倍。