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菜鸟提问:GPC的窄分布标准样是怎么配置的?

  • zhoujingnm
    2012/07/27
  • 私聊

凝胶色谱(GPC)

  • 刚刚接触GPC,很多东西都不大懂,尤其是窄分布和宽分布,已经是搞得头都大了。

    请问各位大侠同志们,如果用窄分布标准样做曲线,是一个溶液里面只有一种标准样品,共配五个溶液呢,还是一个溶液里面有四种标准样品,配五个溶液呢?如果是后者,是不是有些溶液中的标准品会重复?我只有10个PS的标准品。

    还有宽分布标准样是用来测什么的,配制溶液和窄分布标准样有什么区别呢?

    如果我的样品的结构之类与PS相差比较大,我应该怎么去校正所得的标准曲线呢?

    非常感谢大家回帖,帮助一下我这个GPC的菜鸟吧
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  • 小不董

    第1楼2012/07/27

    应助达人

    你使用窄分布的标准样品,看你样品的分子量范围,配置的混标中的高分子分子量不能是一个数量级的,否则柱子可能就不开了, 所以配置的溶液就没用,还有就看你柱子的分量范围,最好是5个样品分别溶解在不同的溶液中,这样就不会有干扰,一个浓度就可以了,GPC不是测定浓度的,但是在配置溶液的时候,分子量大的,浓度可以适量降低,分子量小的可以适当提高。

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  • zhoujingnm

    第2楼2012/07/27

    非常感谢您的帮助哦,就是说一个溶液里面只有一个样品就可以咯?我的样品分子量是在标品分布范围之内的,那宽分布标准样是什么概念呢?

    小不董(doxw0323) 发表:你使用窄分布的标准样品,看你样品的分子量范围,配置的混标中的高分子分子量不能是一个数量级的,否则柱子可能就不开了, 所以配置的溶液就没用,还有就看你柱子的分量范围,最好是5个样品分别溶解在不同的溶液中,这样就不会有干扰,一个浓度就可以了,GPC不是测定浓度的,但是在配置溶液的时候,分子量大的,浓度可以适量降低,分子量小的可以适当提高。

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  • 小不董

    第3楼2012/07/27

    应助达人

    最好是一个溶液里只溶解一个标准样品,样品的分子量要在标准样品分布范围,标准样品的分子量范围也要在柱子分析的分子量范围之内。
    现在我们大多都是用的窄分布的标准样品,然后连接一条曲线,用这个曲线来拟合分析样品的分子量范围。
    宽分布的样品要知道其分布系数和分子量信息。

    zhoujingnm(zhoujingnm) 发表:非常感谢您的帮助哦,就是说一个溶液里面只有一个样品就可以咯?我的样品分子量是在标品分布范围之内的,那宽分布标准样是什么概念呢?

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  • zhoujingnm

    第4楼2012/07/30

    不好意思哦,我还有一个问题,比如说我的样品的结构和性质与PS相差比较大,测出来的分子量与真实的是不是就会相差很大,那有没有办法去校正这个曲线呢?

    小不董(doxw0323) 发表:最好是一个溶液里只溶解一个标准样品,样品的分子量要在标准样品分布范围,标准样品的分子量范围也要在柱子分析的分子量范围之内。
    现在我们大多都是用的窄分布的标准样品,然后连接一条曲线,用这个曲线来拟合分析样品的分子量范围。
    宽分布的样品要知道其分布系数和分子量信息。

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  • donald0214

    第5楼2012/08/09

    一个溶液里面可以放多个标准样品(我做过放三个样),但前提是这三个样的分子量最少相差一个数量级以上,不然峰分不开。

    zhoujingnm(zhoujingnm) 发表:不好意思哦,我还有一个问题,比如说我的样品的结构和性质与PS相差比较大,测出来的分子量与真实的是不是就会相差很大,那有没有办法去校正这个曲线呢?

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  • wanttofly

    第6楼2012/08/09

    GPC标样有单标和混标的,混标溶解以后就有好几个标准品
    没有窄分布就用宽分布,窄分布是分子量,宽分布除了分子量外还有其它参数,用的计算方法会不同
    用PS测就是相对性,你要绝对性就拿你的样品去用光散射检测器做出绝对分子量,下次就用这个做宽分布标样

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  • tigertooth

    第7楼2012/08/13

    关键看柱子,柱子要是能将窄标分开,就3、4个配一起,这样两针就可以做一个标线了。

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  • zihuadd

    第8楼2012/08/18

    因为GPC分子筛的原理,其分子的大小与出峰时间成线性关系,测定的结果是相对于您的标准品计算出来的分子量。如果您的样品与标准品的结构差异较大,如标准品是球形结构,分子量10000的出峰时间为13分钟,但您的样品是线形结构,同样是10000的分子量,其出峰时间就有可能是10分钟,从而导致测定的结果与真实值有非常大的误差。

    针对这种情况,最好是用激光光散射来测定准确度较高。

    实在不行,就用原料厂家提供该产品不同分子量的样品,标定分子量后分别作为对照品进行测定,因为是同一厂家生产的不同分子量的样品,其结构一般比较相似,因此可以相对减少测定误差。

    个人意见,请多指教!

    不好意思哦,我还有一个问题,比如说我的样品的结构和性质与PS相差比较大,测出来的分子量与真实的是不是就会相差很大,那有没有办法去校正这个曲线呢?

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  • kemp

    第9楼2012/08/21

    这就需要通常说的普适校正。你可以看看论坛中相关的帖子

    zhoujingnm(zhoujingnm) 发表:不好意思哦,我还有一个问题,比如说我的样品的结构和性质与PS相差比较大,测出来的分子量与真实的是不是就会相差很大,那有没有办法去校正这个曲线呢?

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  • viscotektegent

    第10楼2012/09/17

    宽分布的标准样品,一般用来标定、或者说检验GPC柱子的分离效果的,看一看这套GPC仪器对已知分子量分布数据的标样的实际测试结果,能否与已知分子量分布数据相等、相一致。如果偏差不大,就可以了。GPC仪器的价值就在于分子量分布的测试。可以测试分子量(数均、重均)的仪器有好几种,但是能测试分子量分布的仪器就很有限了。因此宽分布标样,对于充分发挥GPC的作用,获得准确分子量分布数据来说,是非常重要的。不仅要用窄/单分布标样建立标准曲线,还要用宽分布标样检验色谱柱的实际分离效果是否准确,然后才能开始测试待测样品。

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