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求助高手,峰形不好

  • panhuaming
    2012/08/11
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • a,b为原料,c为生成物,有希夫碱的结构。流动相是ACN:water=50:50,波长:220nm,柱子:C18 4.6*250mm, 求高手指教如何使峰形变好,基线平稳。


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  • 有水有渝

    第1楼2012/08/11

    应助达人

    楼主反应液的溶剂是什么?把water改为10mmol/L磷酸盐缓冲液(PH3.0),同时还可以减少一点进样量试试。

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  • sjzhang156

    第2楼2012/08/11

    你要看看你的试剂空白有没有这个包啊,如果走个纯乙腈没有包证明柱子没有污染,再走个你的原料,看看是不是他们几个带进去的,最后排除不是这些原因才能接着改善分离度啊。

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  • panhuaming

    第3楼2012/08/12

    谢谢哦,
    反应液是异丙醇,
    在水相中加0.1%三乙胺,再加醋酸,使PH值在4左右。还是不行。
    让我郁闷的是,上述条件不行,改用纯化水,做出的峰形就很好。隔天用同样的条件就是做不出峰形好的,

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  • panhuaming

    第4楼2012/08/12

    谢谢,我会试试你的条件的,
    感谢。

    有水有渝(xky0230699) 发表:楼主反应液的溶剂是什么?把water改为10mmol/L磷酸盐缓冲液(PH3.0),同时还可以减少一点进样量试试。

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  • panhuaming

    第5楼2012/08/12

    谢谢,不是柱子,溶剂的问题。我在之前我同样条件走过两个原料,峰形很好。

    sjzhang156(sjzhang156) 发表:你要看看你的试剂空白有没有这个包啊,如果走个纯乙腈没有包证明柱子没有污染,再走个你的原料,看看是不是他们几个带进去的,最后排除不是这些原因才能接着改善分离度啊。

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  • panhuaming

    第6楼2012/08/12

    让我更郁闷的是,生成物用流动相溶解溶液明显变色,与乙腈溶解的相比,明显的a,b峰高/面积变大,c峰高/面积变小。用乙腈溶解溶液我是看不出变色。
    生成物与水有反应,我的流动相里就用水啊,???

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  • 小虾米

    第7楼2012/11/04

    系统出问题了。换个仪器试试!!以前遇到过类似的问题

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  • houjjun

    第8楼2012/11/04

    应该是流动相,比如水有问题,或是溶解样品的试剂有问题,或是样品变质

    panhuaming(panhuaming) 发表:让我更郁闷的是,生成物用流动相溶解溶液明显变色,与乙腈溶解的相比,明显的a,b峰高/面积变大,c峰高/面积变小。用乙腈溶解溶液我是看不出变色。
    生成物与水有反应,我的流动相里就用水啊,???

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