液相做含量测定时，对照品和样品进样体积必须一致吗

应助达人

一般是一致的，楼主想要不一致是出于什么想法，也有一种线性是以相同浓度进不同的体积来完成，但一般不提倡用这种。

我前期做线性的时候 是按照药典法对照品进20微升，但现在做重复性的时候样品进20微升 发现峰形严重拖尾，怀疑是样品过载的问题，进10微升的话峰形就不拖尾啦 ，但是我把样品稀释2倍再 进20微升还是拖尾，这怎么回事呢？难道稀释两倍进20微升 与不稀释 进10微升 不一样吗

一般是溶剂太强的原因，用流动相溶解看看？

应该是溶剂效应吧，或者色谱柱污染，采用低有机相溶剂溶样，或者把柱子好好清洗一下试试。

我前期做线性的时候 是按照药典法对照品进20微升，但现在做重复性的时候样品进20微升 发现峰形严重拖尾，怀疑是样品过载的问题，进10微升的话峰形就不拖尾啦 ，但是我把样品稀释2倍再 进20微升还是拖尾，这怎么回事呢？难道稀释两倍进20微升 与不稀释 进10微升 不一样吗

应助达人

确实有点奇怪，能把色谱条件说明一下，并一张进20与进10的对比图看一下吗？

一个方法通常进样量都是一致的

色谱柱柱效下降导致的

最好保持一致，因为可以避免因为峰形不同而造成的峰面积偏差，从而影响定量结果