请教关于保留时间的两个问题

第二个问题重新说一下，比如某溶液含有0.01mg/ml的尿嘧啶和甲苯，进样HPLC，尿嘧啶在3.0min出峰，甲苯在7.2min出峰。把尿嘧啶浓度变成1mg/ml，甲苯不变，其他均不变，尿嘧啶还在3.0min出峰，甲苯会不会变成7.6min出峰了

影响保留时间的因素有流动相配比和pH、流速、固定相性质、色谱柱长度、柱温等，样品基质对待测组分的保留时间影响较小吧。

实际样品中化合物受到基质的影响，保留时间与标准品是会有所偏离的，因为样品中的其他组分改变了目标化合物周围的流动相环境，而且这种偏移比较常见。但是具体的规定5%这个要求还真没有见到过。

这个好像没有见到过明确的规定，由于影响保留时间的因素比较多，这个是经验值

没见到过具体规定，一个经验值吧

5%仪器默认值。打开工作站看看。 样品浓度相差100倍。峰形不一样，保留时间会有差异。

应助达人

5%一般是当前行业默认的，当然是越接近越好，原则是保留时间一致的可能是同一个物质，保留时间不一致的肯定不能判定为一个物质。最好保留样品与对照品的溶剂完全相同，如果两张图上无法做出判定，建议可以分别取适量的样品溶液和对照品溶液稀释到合适的浓度进样，看峰形，一般使用较低浓度，通过必色谱条件，这样处理后如果不是一个物质，一般在图谱上可以看到色谱峰分叉。

5%是时间窗，是色谱的识别目标峰的默认值，在积分的时候，认为在目标峰保留时间的5%以内的都认为是目标峰，一般如果出峰时间比较长，建议使用时间带

我们做定性的时候，要求保留时间差异不超过2.0%，外加折光率。两个都符合要求，才认为是同一物质。
我们实验室以EP为准