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请做液质的帮忙解下惑(关于定量限检测限)

液质联用(LCMS)

  • 根据5个平行空白样品的色谱保留位置定性离子基线噪音值求其平均值,按信噪比S/N=3为检测限,S/N=10为定量限。这句话是在一文献上看到的,怎么理解“空白样品的色谱保留位置定性离子基线噪音值”?
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  • 小猪飞飞

    第1楼2012/09/12

    应该是在空白样品中,待分析物出峰时间处的基线响应或者空白峰的峰面积称为基线噪音值,即为N,再通过加标样中待测物的峰面积及浓度,计算检出限。

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  • zab000

    第2楼2012/09/12

    谢谢您的回答,还想请问分析物出峰时间处的基线响应是什么呢?另外如果空白样品在分析物出峰时间处没有出峰,那就没法算峰面积了,如果是这样应该怎么做呢?

    小猪飞飞(zpf20031212) 发表:应该是在空白样品中,待分析物出峰时间处的基线响应或者空白峰的峰面积称为基线噪音值,即为N,再通过加标样中待测物的峰面积及浓度,计算检出限。

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  • happy爱米粒

    第4楼2012/09/12

    噪音很多都是一段平滑的基线的,没法计算面积(不足以形成一个色谱峰),楼主只需要选中噪音时间段就可以了

    zab000(zab000) 发表:谢谢您的回答,还想请问分析物出峰时间处的基线响应是什么呢?另外如果空白样品在分析物出峰时间处没有出峰,那就没法算峰面积了,如果是这样应该怎么做呢?

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  • yzulcl

    第5楼2012/09/12

    应助达人

    方法确定了以后,做检测限很简单的。

    用一定浓度的样品上机,会有一个色谱峰(紫外检测器也好,质谱检测器也好),软件里面可以直接计算信噪比(S/N,一般选择peak-to-peak算法,不推荐RMS算法以及平滑等处理)。然后不断降低样品的浓度,一直到信噪比为10就是LOQ。然后平行多进样几次,考察一下RSD就好了。

    对于质谱检测器的 MRM 定量,如果只有一个通道 (transition)就这样就行了。但是一般为了辅助定性,会有至少两个通道,甚至三个通道,这时候还要比较各通道的相对强度。与中等浓度样品的相对强度相比,有一个允许的范围,超出范围的不行。

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  • zab000

    第6楼2012/09/12

    谢谢 happy爱米粒(xgy2005)的回复,我用的仪器是TSQ Quantum Access MAX三重四极杆质谱仪,选中时间段是什么意思呢?这一段的基线噪音值怎么算,用什么表示呢?

    happy爱米粒(xgy2005) 发表:噪音很多都是一段平滑的基线的,没法计算面积(不足以形成一个色谱峰),楼主只需要选中噪音时间段就可以了

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  • zab000

    第7楼2012/09/12

    谢谢 yzulcl(yzulcl)的回复,我用的仪器是TSQ Quantum Access MAX三重四极杆质谱仪,用过按照像您说的不断降低样品的浓度,做到0.1MRL或者是0.05MRL时S/N都大于10,大概几百那样子。因此如果再继续降低的话,做出来的结果意义不是很大吧。

    yzulcl(yzulcl) 发表:方法确定了以后,做检测限很简单的。

    用一定浓度的样品上机,会有一个色谱峰(紫外检测器也好,质谱检测器也好),软件里面可以直接计算信噪比(S/N,一般选择peak-to-peak算法,不推荐RMS算法以及平滑等处理)。然后不断降低样品的浓度,一直到信噪比为10就是LOQ。然后平行多进样几次,考察一下RSD就好了。

    对于质谱检测器的 MRM 定量,如果只有一个通道 (transition)就这样就行了。但是一般为了辅助定性,会有至少两个通道,甚至三个通道,这时候还要比较各通道的相对强度。与中等浓度样品的相对强度相比,有一个允许的范围,超出范围的不行。

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  • chy57589893

    第8楼2012/09/13

    我的理解是最终考虑的信噪比,还是应该以目测为主吧,应为毕竟是基线有样品基质干扰的,只是通过S/N值来判断的话,检出限很难做下去,有时候在图谱里面已经看不出来是个峰了,S/N值还有好几十呢

    zab000(zab000) 发表:谢谢 yzulcl(yzulcl)的回复,我用的仪器是TSQ Quantum Access MAX三重四极杆质谱仪,用过按照像您说的不断降低样品的浓度,做到0.1MRL或者是0.05MRL时S/N都大于10,大概几百那样子。因此如果再继续降低的话,做出来的结果意义不是很大吧。

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  • chy57589893

    第9楼2012/09/13

    能说说如何计算吗?谢谢

    小猪飞飞(zpf20031212) 发表:应该是在空白样品中,待分析物出峰时间处的基线响应或者空白峰的峰面积称为基线噪音值,即为N,再通过加标样中待测物的峰面积及浓度,计算检出限。

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  • happy爱米粒

    第10楼2012/09/13

    请问您软件上不带计算信噪比功能吗?选中时间段,就是选一段谱图(比方说2.52-3.50min),这个通常可以直接在软件里输入,或者是直接用鼠标拖住左键划一下,就选好了

    zab000(zab000) 发表:谢谢 happy爱米粒(xgy2005)的回复,我用的仪器是TSQ Quantum Access MAX三重四极杆质谱仪,选中时间段是什么意思呢?这一段的基线噪音值怎么算,用什么表示呢?

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  • yzulcl

    第11楼2012/09/21

    应助达人

    qqq 的定量,检测限受到“离子相对丰度比”的限制更明显,受 S/N 限制的几乎没有。
    在“离子相对丰度比”的许可范围里面,以我的经验 S/N 至少是100多。这时候,只要平行多次进样,看看峰面积的 RSD,同时关注一下离子相对丰度比不要超出许可范围就 OK 了。

    对于“禁止添加”/“不得检出”的物质,LOQ 做得越低越好,这是直接体现仪器状态和人员技术水平的。
    对于有“残留限量”MRL 的物质,LOQ 做到 0.1 MRL 就足够了,而且是绰绰有余了。

    zab000(zab000) 发表:谢谢 yzulcl(yzulcl)的回复,我用的仪器是TSQ Quantum Access MAX三重四极杆质谱仪,用过按照像您说的不断降低样品的浓度,做到0.1MRL或者是0.05MRL时S/N都大于10,大概几百那样子。因此如果再继续降低的话,做出来的结果意义不是很大吧。

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