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粪大肠菌群的曲折过程

zsj201204

2012/10/15
色谱

粪大肠菌群的曲折过程

从开始做粪大肠菌群这个项目以来，有过不少的疑惑。这些疑惑有的是对以前知识掌握不够，有的则是自己偷懒造成的，还有就是自己的语文水平不行，对方法的理解不到位。

第一次，按照方法要求，配制培养基，使用的电子天平，没什么话说。后来听说这个不用那么精确，就改用托盘天平称量，这时我就犯糊涂了，到底哪边放样品哪边放砝码呢？所以每次都拿电子天平再复称下，验证自己称错没，每次记得回去上网百度，每次回去又忘记了，这么简单的问题又不好意思问别人。

第二次，配制好培养基，没有按照要求调节pH，导致试验失败。后来把书好好看了一遍，原来是用Hcl或NaOH调节pH，牢记配制培养基的主要步骤为：配制、溶化、调pH、过滤、分装、灭菌、检验等。

第三次，前面的没有任何问题了，初发酵结束产气或者产酸（由紫变黄），开始复发酵，直接用玻璃棒蘸取EC培养液在阳性管。结果可以产气，但是操作还是错了。其实也知道这样不对，但是书和方法标准都没有加多少EC培养液，后来就上仪器论坛发帖求助，认识了苹果，不断请教，她不厌其烦的解答。幸好是女的，男的估计早烦了，呵呵。现在这个项目做的总算象样了。初发酵后用接种环蘸取5mlEC培养液到阳性管中，用酒精灯烧红后继续下一个。
接种环

上次再看方法说明，又犯迷糊了。方法上有这么一句话：接种后所有发酵管必须在30min内放进水浴中。因为我用的仪器是隔水式恒温培养箱，我就想到底我培养好了要不要放进水浴中呢？后来上网查了资料原来还可以用水浴锅培养，就想通了。
隔水式恒温培养箱

自从上论坛后，掌握了很多以前不知道的东西。曾经帮领导打不确定度那本书，对粪大肠菌群有没有不确定度也有过疑惑，后来看到过类似的帖子，明白了原因。欢迎做水质生物检测的分享大家实验过程中的问题及解决方法，让新手少走弯路！

分
该帖子已被版主-水源守护者加10积分，加2经验;加分理由:鼓励原创，权限只有10分，先加了

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水源守护者

第1楼2012/10/15

感谢分享心得

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【四季风】

第2楼2012/10/15

我建议还是放置恒温培养箱培养，因为恒温培养箱的温度计经过校准，培养温度较为准确，如果在水浴锅培养的话，水浴锅中上下水温的温差较大。

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【四季风】

第3楼2012/10/15

另外再补充说一句，如果在水浴锅培养，不是在无菌环境下培养，培养管暴露在空气中，不符合微生物培养要求。

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zsj201204

第4楼2012/10/15

不是用塞子塞住的嘛
【四季风】(gpwrx) 发表:另外再补充说一句，如果在水浴锅培养，不是在无菌环境下培养，培养管暴露在空气中，不符合微生物培养要求。

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yuduoling

第5楼2012/10/15

看起来是够曲折的

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zsj201204

第6楼2012/10/15

呵呵，主要自己想偷懒
yuduoling(yuduoling) 发表:看起来是够曲折的

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【四季风】

第7楼2012/10/15

塞子有气孔透气的，试管口易受到空气的污染。

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分
该帖子已被版主-透明加2积分，加2经验;加分理由:意见

zsj201204

第8楼2012/10/15

这个原因没想到，谢谢
【四季风】(gpwrx) 发表:塞子有气孔透气的，试管口易受到空气的污染。

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尘

第9楼2012/10/15

单位没有懂的老师带初期的确很辛苦，俺也是这么过来的，幸好还有论坛

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翠湖园

第10楼2012/10/16

如果有试验数据会更好些

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