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hplc分析方法开发中流动相的调整

液相色谱(LC)

  • 先100%的有机溶剂,再降下来。因为有些分离96%即可分离。

    降的过程遵守3条秘诀:
    1:由强到弱: 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验, 这样可以很快地得到分离结 果,然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。
    2:三倍规则 :每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量,保留因子约增加3倍,此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中,注意观察各个峰的分离情况。
    3:粗调转微调:当分离达到一定程度,应将有机溶剂10%的改变量调整为5%,并据此规则逐渐降低调整率,直至各组分的分离情况不再改变。

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  • 三人行

    第1楼2012/11/10

    我一般根据样品的溶解情况而定,在选择水和有机溶剂都能溶解的样品的流动相有机溶剂比例要小一些;不溶于水只溶于有机溶剂的样品的流动相有机溶剂比例要大一些。

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  • houjjun

    第3楼2012/11/10

    当然你有经验、懂技术、会分析。这个对那些经验少、技术不太懂、不会分析的,可能有些用。一步一步试也是一种好方法

    三人行(jncxyy2012) 发表:我一般根据样品的溶解情况而定,在选择水和有机溶剂都能溶解的样品的流动相有机溶剂比例要小一些;不溶于水只溶于有机溶剂的样品的流动相有机溶剂比例要大一些。

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  • 三人行

    第4楼2012/11/10

    经验是在工作中不断积累的,每个人在调试流动相的过程中,都会总结出一些经验和教训。

    houjjun(houjjun) 发表:当然你有经验、懂技术、会分析。这个对那些经验少、技术不太懂、不会分析的,可能有些用。一步一步试也是一种好方法

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  • houjjun

    第5楼2012/11/10

    那倒是,有些指导会更好。

    三人行(jncxyy2012) 发表:经验是在工作中不断积累的,每个人在调试流动相的过程中,都会总结出一些经验和教训。

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  • 风烟

    第6楼2012/11/11

    流速对保留因子有什么样的影响吗?

    自己试验过,流速调大,保留时间变短;流速调小,保留时间变长.

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  • houjjun

    第7楼2012/11/11

    对,你说的很对,就是这个影响

    风烟(fy32501) 发表:流速对保留因子有什么样的影响吗?

    自己试验过,流速调大,保留时间变短;流速调小,保留时间变长.

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  • nixiaolong

    第8楼2012/11/12

    有的样品,柱温也很重要。

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  • houjjun

    第9楼2012/11/12

    对,有的样品受温度和pH值的影响也很大。

    nixiaolong(nixiaolong) 发表:有的样品,柱温也很重要。

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  • 武灵

    第10楼2012/11/13

    保留因子是反映色谱柱对化合物保留特性的参数,k=(tR-t死)/t死

    houjjun(houjjun) 发表:对,你说的很对,就是这个影响

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  • houjjun

    第11楼2012/11/13

    武灵(zhonghuashendun) 发表:保留因子是反映色谱柱对化合物保留特性的参数,k=(tR-t死)/t死

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