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紫外可见光分光光度计类型讨论

  • hupilan007
    2012/12/26
  • 私聊

紫外可见分光光度计(UV)

  • 大家好,众所周知,按光路分,紫外可见光分光光度计的类型无外乎三种:单光束分光光度计,单波长双光束分光光度计,双波长双光束分光光度计。

    单光束分光光度计结构简单,只有检测池,没有参比池,复合光经单色器过滤出想要的特定波长的光进行样品含量的测定。优点:操作简单,光强度大,光信噪比高。 缺点:不能抵消因杂散光、光源波动、电子学的噪声等对测试结果的影响。

    单波长双光束分光光度计结构稍微复杂,一般分为三种,一种为有两束光,一束光通过比色皿,一束光不通过比色皿,有两只光电转换器。一种为两束单色光,两只比色皿,一只光电转换器,一种为两束单色光,两只比色皿,两只光电转换器。问题出来了,为什么会有光电转换器数量的不同呢? 两只光电转换器会存在不一致,导致测量误差,那为什么会有存在的必要呢?大家知道,如果是一只光电转换器的光度计,在最后的计算时,两束光的比值做为测定结果显示(一般透射光/反射光)那么两只光电转换器的光度计在计算时也是这样吗?其实会导致结果的误差的。我个人理解是不是跟光的强度有关,双光电转换器可以增加光的强度,提高检测的灵敏度。
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  • tutm

    第1楼2012/12/26

    “大家知道,如果是一只光电转换器的光度计,在最后的计算时,两束光的比值做为测定结果显示”

    这个理解是错误的,应该是最后计算时只是按样品一侧光束在放参比调零(或扫描基线)时和放样品读数时的光强度数据计算测定结果;“参比”位置的光束只是对前者起漂移变化的补偿计算作用。

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  • 爆发吧,小宇宙

    第2楼2012/12/27

    也就是一束光计算结果,另一束只是做补偿用的,对吗?两束光有没有差别呢?加入对调后结果会不会变化?

    tutm(tutm) 发表:“大家知道,如果是一只光电转换器的光度计,在最后的计算时,两束光的比值做为测定结果显示”

    这个理解是错误的,应该是最后计算时只是按样品一侧光束在放参比调零(或扫描基线)时和放样品读数时的光强度数据计算测定结果;“参比”位置的光束只是对前者起漂移变化的补偿计算作用。

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  • hupilan007

    第3楼2012/12/27

    哦,你说的是单光束的光度计,我的算法是单波长双光束分光光度计,这个最后的定量的确是两束光的比值作为测定结果的。

    tutm(tutm) 发表:“大家知道,如果是一只光电转换器的光度计,在最后的计算时,两束光的比值做为测定结果显示”

    这个理解是错误的,应该是最后计算时只是按样品一侧光束在放参比调零(或扫描基线)时和放样品读数时的光强度数据计算测定结果;“参比”位置的光束只是对前者起漂移变化的补偿计算作用。

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  • hupilan007

    第4楼2012/12/27

    补偿是为了除去因杂散光、光源波动、电子学的噪声等对测试结果的影响,两束光只是经过反射投射而分开的光,理论上没什么差别。加入对调是什么意思?

    爆发吧,小宇宙(yw0108) 发表:也就是一束光计算结果,另一束只是做补偿用的,对吗?两束光有没有差别呢?加入对调后结果会不会变化?

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  • 爆发吧,小宇宙

    第5楼2012/12/27

    理论上没差别,就是一样的。明白。

    hupilan007(hupilan007) 发表:补偿是为了除去因杂散光、光源波动、电子学的噪声等对测试结果的影响,两束光只是经过反射投射而分开的光,理论上没什么差别。加入对调是什么意思?

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  • 祥子

    第6楼2012/12/27

    不大清楚,看到一个帅图,顺便发这里吧。是ADI 的

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  • 祥子

    第7楼2012/12/27

    那要看 说明书 上 是怎么 操作的

    hupilan007(hupilan007) 发表:哦,你说的是单光束的光度计,我的算法是单波长双光束分光光度计,这个最后的定量的确是两束光的比值作为测定结果的。

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  • hupilan007

    第8楼2012/12/27

    这个图画得就比较清晰了,光源经过入射狭缝,过光栅,反射镜,出射狭缝,透/反镜分出两道光束,然后先后进入参比池和样品池,出来的光经光电二极管,然后分别经光电转换器转换成电信号,最后到处理器。显然这个是单波长双光束分光光度计哦。

    问题貌似没有如何计算的哦?

    祥子(nemoium) 发表:不大清楚,看到一个帅图,顺便发这里吧。是ADI 的

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  • tutm

    第9楼2012/12/27

    “也就是一束光计算结果,另一束只是做补偿用的,对吗?”,完全对,就是这样的。

    “两束光有没有差别呢?”,是指光能量吧,有差别的。制造仪器时,元器件不可能完全对称,但一般会尽量调到接近。但是使用中,一段时间后就会有明显差别。这可通过检测和对比两束光的能量曲线(Er,Es)看到,这可能是两个光路上的元器件老化或污染程度差异造成的。

    最后一个问题看不太明白。

    爆发吧,小宇宙(yw0108) 发表:也就是一束光计算结果,另一束只是做补偿用的,对吗?两束光有没有差别呢?加入对调后结果会不会变化?

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  • 爆发吧,小宇宙

    第10楼2012/12/27

    不好意思,是(假如对调。。。)。

    明白了。

    tutm(tutm) 发表:“也就是一束光计算结果,另一束只是做补偿用的,对吗?”,完全对,就是这样的。

    “两束光有没有差别呢?”,是指光能量吧,有差别的。制造仪器时,元器件不可能完全对称,但一般会尽量调到接近。但是使用中,一段时间后就会有明显差别。这可通过检测和对比两束光的能量曲线(Er,Es)看到,这可能是两个光路上的元器件老化或污染程度差异造成的。

    最后一个问题看不太明白。

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