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硅胶色谱柱正相流动相 基线不稳

液相色谱(LC)

  • 这两天用正相硅胶柱检测一个样品,具体色谱条件是:流动相:二氯甲烷+正己烷+冰醋酸(70+30+0.5),波长254nm,

    流速0.8ml/min;柱子在运行流动相之前先用异丙醇小流速冲洗了1个小时,基线很平;接着用正己烷冲洗了1个小时,基线也很平稳,但是一换上流动相,基线就很不稳。刚开始怀疑可能流动相里进了水,但是把溶剂都换了又重新配了两遍,还是这种情况,只要用正己烷冲洗柱子,基线就能稳下来,只要一换流动相基线就特别不稳。第一次遇到这种情况,现在不知道到底该怎么解决了,望高手们多多帮,非常感谢。稳定和不稳定的基线,我以WORD的形式上传到附件了,急需救助!

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  • tangtang

    第1楼2013/01/09

    既然是流动相引起的,可逐个排查,比如去掉冰醋酸试试。

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  • 三人行

    第2楼2013/01/09

    怀疑是柱子里面异丙醇没有洗脱干净,我们换系统时,先不接色谱柱,用两通阀连接。

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  • 花吹雪

    第3楼2013/01/10

    先谢谢您的帮助! 去掉冰醋酸的我也试过了,还是那样,可还有其他的方法,望指教!

    tangtang(tangtang) 发表:既然是流动相引起的,可逐个排查,比如去掉冰醋酸试试。

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  • 花吹雪

    第4楼2013/01/10

    先谢谢您的帮助!我的系统由反相换到正相时,是先用两通阀冲洗的,柱子是用异丙醇,正己烷,流动相一系列冲下来的,中间倒是未换成两通阀,觉得分别各自冲一个小时,压力都挺稳得,应该置换过来了吧?不知你们平时都是冲洗多长时间啊?

    三人行(jncxyy2012) 发表:怀疑是柱子里面异丙醇没有洗脱干净,我们换系统时,先不接色谱柱,用两通阀连接。

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  • 三人行

    第5楼2013/01/10

    是这样的,因为正相柱是保存在正己烷中,所以冲异丙醇时要用两通,系统用正己烷将异丙醇导出后,再接色谱柱。

    花吹雪(yanglijuan0828) 发表:[先谢谢您的帮助!我的系统由反相换到正相时,是先用两通阀冲洗的,柱子是用异丙醇,正己烷,流动相一系列冲下来的,中间倒是未换成两通阀,觉得分别各自冲一个小时,压力都挺稳得,应该置换过来了吧?不知你们平时都是冲洗多长时间啊?

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  • jiaodandan

    第6楼2013/01/11

    出现这种谱图我的第一反应是检测器的故障,比如有池子里有气泡了。不知道楼主后来解决没有!

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  • xiaowang268

    第7楼2013/01/14

    是单通道跑流动相吗?

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  • doczheng

    第8楼2013/03/27

    流通池污染也说不定

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  • wlzj2008

    第9楼2013/03/27

    我们也换流动相的时候,也尽量不通柱子

    三人行(jncxyy2012) 发表:怀疑是柱子里面异丙醇没有洗脱干净,我们换系统时,先不接色谱柱,用两通阀连接。

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  • 有水有渝

    第10楼2013/03/30

    应助达人

    是首次使用这个流动相还是以前用都不会只这次会?建议流动相重新脱气,再用异丙醇-正已烷过渡,流动相排气后再试试看,如果还不行,有可能就是检测池有气泡。

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