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[求助]分离度不好,怎么办?

液相色谱(LC)

  • 各位大虾,我现在在做一个酸性物质PH大概在5-6之间,所用流动相为磷酸缓冲液和乙腈,发现在血浆中的干扰非常大,又分离不开,该怎么办呢?曾经试过用醋酸钠缓冲液分离度也不好!还望多多指教!
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  • honest

    第1楼2006/06/14

    有没有用梯度洗脱试试?或者调整流动相的pH试试

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  • hanke2006

    第2楼2006/06/15

    适当增大缓冲盐的比列试试,如果分开了但时间拖得很长,就尝试梯度洗脱

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  • tanggangfeng

    第3楼2006/06/15

    出峰时间是不是比较快。如果是,降低乙腈含量,同时使用甲醇。用三个流动相做。

    zzz 发表:各位大虾,我现在在做一个酸性物质PH大概在5-6之间,所用流动相为磷酸缓冲液和乙腈,发现在血浆中的干扰非常大,又分离不开,该怎么办呢?曾经试过用醋酸钠缓冲液分离度也不好!还望多多指教!

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  • zzz

    第4楼2006/06/15

    出峰时间大概在6分钟左右,用梯度做了,但是血浆中的杂质也跟着一起跑,还是分不开啊!

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  • tanggangfeng

    第5楼2006/06/15

    问一下,你的样品分子量有多大?普通的c-18,好像不大适合大分子的物质分离,如果是大分子,可以换大孔径的C-18柱。
    流动相像30(水+缓冲溶液):20乙腈:50甲醇三者等度试试。

    zzz 发表:出峰时间大概在6分钟左右,用梯度做了,但是血浆中的杂质也跟着一起跑,还是分不开啊!

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  • bobby1985

    第6楼2006/06/15

    研浓度还是不要过大为好,最好能试试梯度洗脱!

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  • zzz

    第7楼2006/06/16

    分子量不大,300多,唉,真是郁闷。试了好多梯度了,都没把它分开,难道非要用质谱测?

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  • 茅茅

    第8楼2006/06/17

    有质谱的话用LC-MS/MS更方便!

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  • jinyixiao

    第9楼2006/06/18

    将供试品液通过聚酰胺柱子除去杂质,再进样试一下

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  • sunjing79

    第10楼2006/06/18

    可以尝试一下调整一下流动相pH,让其酸度下降一点试试看

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