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生物体液样品分析前处理

省部重点实验室

2013/03/08

生命科学仪器综合讨论

名称：通用SPE萃取程序
关键词：固相萃取(SPE)
目的：生物体液样品分析前处理
主体内容：
1.反相填料
活化:
1）用3-5ml甲醇冲洗填料。
2）用3-5ml水或缓冲液冲洗，上样前勿让填料流干。
上样:
样品加到柱床上，以1-5ml/min.低流速通过填料。若所需样品不会被保留，此时应收集样品作分析。
洗脱:
如果样品被保留，使用约5ml极性溶剂(如水、缓冲液或有机溶剂/水混合液)将弱保留干扰物洗出。
收集:
用1-2ml非极性溶剂将所需物质洗脱，收集用于分析。
2.正相填料
活化：
用3-5ml非极性溶剂冲洗填料
上样：
样品加到柱床上，以1-5ml/min.低流速通过填料。若所需样品不会被保留，此时应收集样品作分析。
洗脱：
如果样品被保留，使用约5ml非极性溶剂将弱保留干扰物洗出。
收集：
用1-2ml极性溶剂将所需物质洗脱，收集用于分析。
3.离子交换填料
活化：
用5ml去离子水或低离子强度缓冲液(0.001M-0.01M)冲洗填料
上样：
样品加到柱床上，以1-5ml/min.低流速通过填料。若所需样品不会被保留，此时应收集样品作分析。
冲洗：
如果样品被保留，使用约5ml去离子水或低离子强度缓冲液将弱保留干扰物洗出。
收集：
用1-5ml高浓度缓冲液(0.1-0.5M) ，或以缓冲液改变pH，使得样品不再离子化，将所需物质洗脱，收集用于分析。

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