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微生物大肠菌群

  • sunqiaoli8
    2013/03/11
  • 私聊

食品毒素/微生物检测

  • 微生物检测时,大肠杆菌属于什么样的菌,革兰氏染色后呈现什么颜色,注意,我问的是大肠杆菌,不是大肠菌群,还有革兰氏染色的原理是什么?
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  • 牛牛

    第1楼2013/04/24

    大肠埃希氏菌(Escherichia coli )通常称为大肠杆菌,1885年由Theodor Escherich发现,分布在自然界,大多数是不致病的,主要附生在人或动物的肠道里,为正常菌群,少数的大肠杆菌具有毒性,可引起疾病

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  • 牛牛

    第2楼2013/04/24

    大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli) 革兰氏阴性短杆菌,大小0.5×1~3微米。周身鞭毛,能运动,无芽孢。能发酵多种糖类产酸、产气,是人和动物肠道中的正常栖居菌,

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  • 牛牛

    第3楼2013/04/24

    革兰氏染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌,是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。G-菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质,而且肽聚糖层较薄、交联度低,故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质,增加了细胞壁的通透性,使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出,结果细菌就被脱色,再经蕃红复染后就成红色。G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高,类脂质含量少,经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小,通透性降低,因此细菌仍保留初染时的颜色,呈现蓝紫色

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  • 牛牛

    第4楼2013/04/24

    革兰氏染色法流程
    1、 取载玻片用纱布擦干,载玻片的一面用marker笔画一个小圈(用来大致确定菌液滴的位置)。涂菌的部位在火焰上烤一下,除去油脂。
    2、 涂片:
    液体培养基:左手持菌液试管,在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖;右手持接种环在火焰中烧灼灭菌,等冷却后从试管中沾取菌液一环,在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜,最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。
    固体培养基:先在载玻片上滴一滴无菌水,再用接种环取少量菌体,涂在载玻片上,使其薄而均匀。

    革兰氏染色
    3、 晾干:让涂片在空气中自然干燥。
    4、 固定:让菌膜朝上,通过火焰2-3次固定(以不烫手为宜)。
    5、 染色:将固定过的涂片放报纸上,滴加草酸铵结晶紫液,染1min。
    6、 水洗:用水缓慢冲洗涂片上的染色液,用吸水纸吸干。简单染色结束可观察细胞形态。
    7、 媒染:滴加1滴碘液,染1min,水洗。
    8、 脱色:吸去残留水,连续滴加95%乙醇脱色20-30s至流出液无紫色,立即水洗。
    9、 复染:滴加蕃红复染3-5min,水洗。至此,革兰氏染色结束。

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