液质联用(LCMS)
瓢虫
第1楼2006/06/23
同一样品隔一定时间(2小时或1晚上)再测,该样品是重新提取,还是提取后进样?如果是提取后进样,可能原因是:溶剂挥发或代谢物在复溶溶剂中分解成目标化合物。
Easy-Boy
第2楼2006/06/23
有可能是目标化合物转化。
q_3016
第3楼2006/06/23
明白了,会照做
cxz5
第4楼2006/06/23
谢谢楼上俩位的指点!是处理之后的同一份样品,放置一段时间再测,目标化合物的浓度越来越高。原来浓度很低的组织,放置后再测,其峰面积明显增大。1.溶剂挥发的可能性较小。因为进样瓶放2个小时,没有那么多溶剂挥发。2.如果是目标化合物和其他代谢物发生了转化,这种情况如何确证?原型药是一个皂苷,在样品处理时如何控制转化?恳请大家提点建议,新手上路,多谢了!
第5楼2006/06/23
想到以下俩点,不知是否合理?1.样品处理后,代谢物容易转化成原形药吗?这是一个皂苷,文献报道它的代谢产物主要是掉糖的,脱甲基的,还有开环反应.2.有没有可能是原形药与某种结合型存在一个动态平衡,放置后结合型的不断释放出游离型的?如果是这种情况该怎么处理?
第6楼2006/06/26
一般药物在体内的二相反应是生成葡萄糖醛酸或硫酸酯轭合物,固可以用相应的酶水解后检测,或者可以用酸水解检测,但这样可能要测苷元。你还可以查下相关文献。Good luck!
第7楼2006/06/26
1.谢谢!该皂苷在体内主要是发生一相水解反应。苷元和原型药的活性是有差异的,所以组织分布还是计划测原型药。2.新发现一个问题是,用已腈沉淀蛋白法处理组织样品后发现有离子抑制现象,进几针后响应明显降低。样品处理打算再加大乙腈用量或考察SPE。大家还有什么建议?谢谢!
第8楼2006/06/26
皂苷用乙酸乙酯做液液萃取应该还可以,你试过没?固相萃取稳定性不是特别好,成本也较高。
第9楼2006/06/26
再次谢谢斑竹的热心帮助!这个皂苷连四个糖,极性较大。液液萃取我试过,乙酸乙酯基本提取不出,乙酸乙酯加入部分异丙醇还是不行。所以只好在沉淀蛋白或者是SPE上下功夫了。另外,不知道用强酸如高氯酸处理如何,进质谱有何影响?
第10楼2006/06/26
如用高氯酸沉淀蛋白,处理后最好还要中和一下,此外它对质谱估计有很强的抑制作用,所以建议不要去试了!你还是先试试SPE吧!不行的话,个人建议还是作水解检测苷元,很多文献多这么做!Good luck!
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