液相色谱(LC)
三人行
第1楼2013/05/15
我先来反相流动相的有机溶剂主要是是甲醇和乙腈对流动相的优化主要在水相上下功夫,水里可以加酸、加碱、加盐,从而改善峰形、提高分离度。流动相里加碱的情况比较少,主要还是加酸,常用的酸有磷酸、三氟乙酸、甲酸、乙酸、高氯酸、甲基磺酸等,其中最常用的是磷酸和三氟乙酸,磷酸在低波长下没有紫外吸收,而三氟乙酸在低波长下有,但是三氟乙酸易挥发而磷酸不行,所以单纯做液相,低波长下磷酸最合适,三氟乙酸有吸收,运行梯度时基线漂移很严重,而做液质就要考虑首选三氟乙酸了,也可以加甲酸或乙酸。一般情况下这几种酸没有太大区别,更多的是考虑通过加酸改变流动相的pH值,从而改善样品的分离度和峰形。
老多_小多
第2楼2013/05/15
技巧好像没有什么特别,只是有时候走梯度的时候把3-4 个通道混合为2个,也许有很好的效果
第3楼2013/05/15
是啊,通道多了更容易出问题。
vip_pis
第4楼2013/05/15
我们工程师平时做实验做的少,一般都是看别人做实验。给用户的建议就是保持实验室的清洁,保持流动相的清洁,特别是用缓冲盐做流动相的,定期更换流动相能更好的保护仪器。
第5楼2013/05/15
这些维护也很重要。
cminzhen
第6楼2013/05/15
我们流动相一般都是水相和有机相组成,水相一般加一些酸,磷酸盐等,流动相要注意的就是一定要过滤,不管其中盐类有多少,哪怕一点点也要,流动相上机前必须要超声脱气!
doczheng
第7楼2013/05/16
一般含盐和不含盐的流动相都有一个更换时间的,我这边约定的含盐三天,不含五天
第8楼2013/05/16
如果做课题都用同一个流动相咋办?
第9楼2013/05/16
这样的话,可以预测一下实验的进度,个人建议盐和有机相最好在使用之前混合,原因有以下几点1,盐的配制方便,多配点,就算浪费,成本也不高2,盐和有机溶剂混合后,保存时间稍微长点,多用于溶解样品,3,针对分离效果,新配制的流动相效果总是好些
第10楼2013/05/16
不过缓冲盐不能放置时间过长,容易长菌哦。
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