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用HILIC柱子做了下氨基糖苷类,发现有其丑无比的峰!

液质联用(LCMS)

  • 氨基糖苷类药物我们要做庆大霉素,安普霉素,丁胺卡那霉素,链霉素,新霉素!

    丁胺卡那霉素和链霉素的峰都出得不错,而且还分得很开,但是庆大霉素的峰就很奇怪了~~~~

    流动相a是10mm乙酸胺+0.1%甲酸,b相是0.1%甲酸乙腈

    先来张mrm图



    下面是庆大霉素的提取离子图





    还有安普霉素的峰也是十分诡异的





    - -!请问各位大侠到时是哪里出错的呢?就是有几种药做不出啊,我也很郁闷啊!
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  • starvivi

    第1楼2013/05/28

    出峰时间有点后吧。。。

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  • sukiliang

    第2楼2013/05/28

    是有点后了,现在在重新摸索方法!

    starvivi(starvivi) 发表:出峰时间有点后吧。。。

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  • qubin2000

    第3楼2013/05/28

    样品配制的溶剂可能有影响,而且影响还不小;洗针液是否要更换;重新设置梯度;换Amide柱试试

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  • sukiliang

    第4楼2013/05/28

    样品是用初始流动相来定容的,洗针液每天都会更换,梯度都设置过好多遍了,还是走这样,很费解,不过氨基糖苷类药物真的是不好做!

    qubin2000(qubin2000) 发表:样品配制的溶剂可能有影响,而且影响还不小;洗针液是否要更换;重新设置梯度;换Amide柱试试

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  • continuum

    第5楼2013/05/29

    回溶液加1%FA试试看
    另外这几个你去看paper 峰都不会太完美

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  • sukiliang

    第6楼2013/05/29

    1%FA的ph那是很低的了,柱子的ph承受能力好像没那么低!谢谢你的建议!

    回去测测ph看看,不过这柱子比c18的好多了,最起码不会一次性一个峰就出完!

    continuum(continuum) 发表:回溶液加1%FA试试看

    另外这几个你去看paper 峰都不会太完美

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  • netsking

    第7楼2013/05/30

    从图来看,象是梯度走的快了点.
    有两种可能, 1)是梯度在8分钟后升的太快了.2)是在洗柱后,平衡时间不够.
    而后一种情况的可能性比较高.

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  • guby

    第8楼2013/05/31

    你的这些霉素相应重现性好么?

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  • sukiliang

    第9楼2013/05/31

    谢谢专家指点!

    我们平衡时间为了保险起见用了6min。我再试着调下条件先!

    netsking(netsking) 发表:从图来看,象是梯度走的快了点.
    有两种可能, 1)是梯度在8分钟后升的太快了.2)是在洗柱后,平衡时间不够.

    而后一种情况的可能性比较高.

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  • sukiliang

    第10楼2013/05/31

    因为这些霉素刚做没多久,重现性暂时来看还是可以的!

    guby(guby) 发表:你的这些霉素相应重现性好么?

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