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流动相PH对样品的影响

液相色谱(LC)

  • 今天分析样品,实验条件如下:

    流动相为0.05mol/L醋酸钠溶液(含0.25%三乙胺ml/ml)用乙酸调pH6.0:甲醇=50:50

    检测波长302nm

    柱温30℃

    流速1.0ml/min

    柱子:菲罗门氰基柱

    刚开始配流动相,一不小心激动了下,加完甲醇才想起来要调pH,问问老师傅,老师傅应该没关系,有时候有人也是这么配的,我突然想了下,加完甲醇调pH 和先调pH再加甲醇有什么区别?然后我开始按照先调pH后加甲醇又配了一部分流动相。

    开始上机,稳基线,先走一针空针,观察基线稳定情况,很好,开始走样品,先用加了甲醇调pH的流动相走样品:

    如下图







    然后以先调pH再加甲醇的流动相走样品,图谱如下







    从以上色谱图可以看出来,两种流动相对样品的影响主要在于3.1-3.4的色谱峰,正常的图谱应该是先调pH 后加甲醇的流动相走出来的图谱!

    从以上图谱可以看出,流动相的pH对于样品的分析很重要,您对流动相的pH知道多少呢?
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  • zhw19811005

    第1楼2013/06/13

    流动相的pH是一个很重要的参数

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  • doczheng

    第2楼2013/06/13

    相当的重要,我曾经尝试过之前或者之后调节pH,除了分离度之外,还能影响出峰的顺序,而且pH只相隔了0.3不到

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  • 三人行

    第3楼2013/06/14

    这得看最初的流动相是怎样配制的,这需要做方法学验证的。

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  • 艾亚哥斯

    第4楼2013/06/14

    这是个非常经典并且值得讨论的问题

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  • 老多_小多

    第5楼2013/06/14

    其实样品的pH也很重要,当然流动相的pH更为重要啦

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  • remioromen

    第6楼2013/06/15

    看着保留时间变化不大,但是峰型和峰面积变化很大啊,能公布下峰面积的差异量吗?

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  • 有水有渝

    第7楼2013/06/15

    应助达人

    除杂质峰形、响应强度等变化,主成分峰的保留时间还是有明显差异的,说明两流动相的pH有差异。

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  • nixiaolong

    第8楼2013/06/15

    ph 是液相很重要的一个参数,不仅影响到你所检测的样品分子离子状态,而且影响分离度,出峰顺序 时间

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  • 振奋号

    第9楼2013/06/15

    有机溶剂分别+单独的磷酸、甲酸、乙酸水之间比较出峰顺序会有变化,后两者顺序基本一致但分离度会有差异。具体的缓冲盐就没怎么研究了

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  • cminzhen

    第10楼2013/06/15

    这个是我在做有关物质的时候的图谱,主峰的保留时间对我来说应该问题不大,关键是杂质....分的越开越好,越大越好

    remioromen(remioromen) 发表:看着保留时间变化不大,但是峰型和峰面积变化很大啊,能公布下峰面积的差异量吗?

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