饲料中真蛋白的测定

饲料中真蛋白的测定方法

2.2.2 消化

将干燥后的沉淀连同滤纸一起放入消化管中，加入15mL浓硫酸，3g硫酸钾，0.2g硫酸铜，放在石墨消解炉上设置温度梯度升温消化（同时做空白试验）。

升温程序：

消解完成后，冷却，待上机。

2.2.3 测试

将冷却后的消化管置于K1100F全自动凯氏定氮仪上，设置参数：硼酸20mL，碱 50mL，稀释水10mL，蒸馏5min。依次做空白及样品，结果自动计算，打印。

3.结果与讨论

3.1 样品空白消耗滴定酸的体积

3.2 饲料中粗蛋白的测定

3.3 饲料中真蛋白的测定

4号样品测得结果偏低，可能是在过滤的过程中造成损失，因此平均值计算时将其舍去，通过3.2与3.3的数据对比可以看出两者相差近2%，除去操作损失基本可以判断饲料中确实含有非蛋白氮成分。8号和9号样品分别添加一定量的尿素、硫酸铵，但是真蛋白含量与其他样相差不大，所以可以验证此方法测定饲料中真蛋白的可行性。

4.结论

通过硫酸铜等重金属盐在碱性环境下是蛋白质变性，过滤掉非蛋白氮成分，再利用凯氏定氮法测定蛋白质含量，操作并不复杂，且结果令人满意，通过添加非蛋白氮（尿素、硫酸铵）成分验证了此方法的适用性，可以用于实际的真蛋白检测中。

5.注意事项

5.1倾泻法过滤洗涤时，烧杯中的沉淀物一定要彻底清洗。且洗涤时要用80℃左右的热水，可以减少洗涤次数。

5.2沉淀必须要烘干，不可带有大量水分放入消化管消化，否则会过冲，造成实验失败。

5.3在石墨炉上消化时，应设置梯度升温，避免样品直接高温出现过冲现象。