1、实验部分
1.1仪器与试剂
1.2 样品处理
1.3 固相萃取
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第一步采用C18固相萃取,如表1;第二步采用Florisil固相萃取,如表2。
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Florisil固相萃取洗脱液用二氯甲烷3 mL提取两次。提取液用作为第二步上样。
![](https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2013073110210186_01_0_3.jpg)
甲醇洗脱液用氮气吹干,加1.0mL流动相溶解提取物,过0.45μm滤膜,供液相色谱分析。
1.4 实验条件[div]
色谱柱:Labtech C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)流速:1.0 mL/min紫外检测波长:238 nm进样量:20 μL柱温:20℃流动相:乙腈/水 体积比1:1[/div]
2、结果和讨论2.1 苄嘧磺隆的HPLC色谱图将2 μg/mL的苄嘧磺隆进HPLC得到色谱图见图1![](https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307311102_454928_2760943_3.jpg)
图1 苄嘧磺隆的标准品色谱图
2.2、重复性取苄嘧磺隆标样2 μg/mL进样,5次重复性标准偏差为2.9%。结果见表3和图2![](https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307311108_454934_2760943_3.jpg)
![](https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307311102_454929_2760943_3.jpg)
图2 苄嘧磺隆的重叠图
2.3、标样、大米样品的空白样和加标样的色谱图 将大米样品和加标样经过提取、净化,加标量为0.04 mg/kg,后进HPLC得到标样色谱图3、空白色谱图4、空白加标样图5和综合叠加图6![](https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307311103_454930_2760943_3.jpg)
图3 标样色谱图(0.04mg/kg)
![](https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307311103_454931_2760943_3.jpg)
图4大米样品空白色谱图
![](https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307311103_454932_2760943_3.jpg)
图5大米样品空白加标的色谱图
![](https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307311104_454933_2760943_3.jpg)
图6综合叠加图
备注:蓝色谱图为大米提取液空白;紫色谱图为标样;黑色谱图为大米提取液加标3.4 大米样品过SPE净化的回收率及RSD 加标样品(加标浓度0.04 mg/kg)经提取、SPE净化处理,并用 HPLC 分析,计算加标回收率及相对标准偏差,苄嘧磺隆回收率均在85%,RSD 小于 10%(表 4)。![](https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307311108_454935_2760943_3.jpg)
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仪器:Smart Prep Ectractor全自动固相萃取仪(Horizon ,美国);Labtech C18固相萃取柱;Florisil固相萃取柱;LC600二元高压梯度高效液相色谱;Multivap-8平行浓缩仪(北京莱伯泰科仪器有限公司)
试剂:水(屈臣氏的纯净水);甲醇(分析纯);乙腈(色谱纯);二氯甲烷(分析纯);正己烷(分析纯);4%氯化钠水溶液;苄嘧磺隆标准品 ,纯度97%。
![](https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2013073110541575_01_0_3.jpg)
1.2.1样品制备:取大米样品约100 g用粉碎机粉碎过20目筛,装入洁净的容器。
1.2.2提取:称取粉碎后的大米粉10 g(精确到0.01 g),放入250 mL锥形瓶中,加入50 mL二氯甲烷,于振荡器上振荡30 min,静置10 min,将提取液过滤于250 mL浓缩瓶中。残渣再加入50 mL二氯甲烷提取一次,合并两次滤液,于40℃水浴浓缩至干。
2.2.3净化:将浓缩后的提 取物用40 mL40%氯化钠水溶液,转移至分液漏斗。加入20 mL正己烷振荡10 min静置分层,弃去正己烷层,重复以上操作一次。加入30 mL二氯甲烷,振荡10 min静置分层,收集二氯甲烷层,重复以上操作一次,合并二氯甲烷提取液,40℃水浴浓缩至干,用10 mL水分两次溶解残渣。