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怎么确定样品浓度呢

  • 生活就这么美好
    2013/09/14
  • 私聊

化学药检测

  • 一个新药的研发,在确定有关物质分析方法时,这个样品浓度怎么定呢?进样量呢?
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  • tianru的爸爸

    第1楼2013/09/14

    举个例子:
    我们常做的蛋白溶液,通常浓度在1-2mg/ml,有关物资一般要求不超过3%,或者1%、0.5%几个档。
    如果是3%,可以用SE-HPLC方法分析,如果1%或者0.5%就可以用RP-HPLC等有浓缩效果的方法分析。

    如果产物是干粉,可以选择蛋白的浓度:一般就尽可能增加有关物资的量,就是最大量进行溶解干粉,同时要确保在分析时主要物质不干扰有关物质的检测,所以一般有所规定一个具体的浓度。这个浓度是根据分析方法的灵敏度来定的。

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  • 生活就这么美好

    第2楼2013/09/14

    那化药呢,没这么大浓度吧

    tianru的爸爸(lxdongzi2003) 发表:举个例子:
    我们常做的蛋白溶液,通常浓度在1-2mg/ml,有关物资一般要求不超过3%,或者1%、0.5%几个档。
    如果是3%,可以用SE-HPLC方法分析,如果1%或者0.5%就可以用RP-HPLC等有浓缩效果的方法分析。

    如果产物是干粉,可以选择蛋白的浓度:一般就尽可能增加有关物资的量,就是最大量进行溶解干粉,同时要确保在分析时主要物质不干扰有关物质的检测,所以一般有所规定一个具体的浓度。这个浓度是根据分析方法的灵敏度来定的。

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  • 生活就这么美好

    第4楼2013/09/14

    还有这个进样量是怎么决定的呢?应该和浓度有关系吧

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  • zzz23010402

    第5楼2013/09/14

    一般根据仪器的灵敏度定吧~化药10或100吧

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  • tianru的爸爸

    第6楼2013/09/15

    进样量是根据分析方法来确定的。

    如果做含量分析:根据线性方程的上下限确定。

    如果是杂质的限量方法:根据限量的值来定,如,

    SE-HPLC分析蛋白溶液,正常上样量要求不少于20微克或者不少于20微升(最大不超过100微升),目的是控制上样体积在20-100微升之间,蛋白量在20-100微克之间。而一般要求杂质在1%之下,则理论上要600纳克蛋白(杂蛋白,也可以是有关物质),而这个200纳克,就是因为一般SE-HPLC的定量下限就在100纳克,所以有200纳克就可以定量,同样也可以用在限量上。实际上是根据分析方法来倒推计算的。

    ——因为分析方法确定了最低检测100纳克(杂质),而按照要求杂质超过1%要报告,所以总上样量不少于10微克,至于浓度,是因为分析方法一般上样量不超过100微升,所以要控制一定的浓度,一般控制在1mg/ml附近:最后确定上样量为不少于20微克,上样体积不少于20微升。(如果浓度过高就稀释后再分析。)

    如果换成化药,同样的道理:如果做杂质分析,先确定杂质比例(就是要报告、计算的比例),再确定方法的最低定量限(最好就是该杂质的),或者检测限,根据这些计算上样量的最低值,再确认分析方法的处理体积(色谱分析就是每次的上样量),确定最低浓度,最好确定一个好操作、好记忆的量。

    生活就这么美好(xiaowang268) 发表:还有这个进样量是怎么决定的呢?应该和浓度有关系吧

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  • tianru的爸爸

    第7楼2013/09/15

    如果你的化药在该方法中,灵敏度不够高,而又要求测定出一定量的杂质,如0.5%,而浓溶液又得不到,则有可能你要换方法,或者改良现有的方法。

    生活就这么美好(xiaowang268) 发表:那化药呢,没这么大浓度吧

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  • 生活就这么美好

    第8楼2013/09/15

    那一般的浓度是多少呢?

    tianru的爸爸(lxdongzi2003) 发表:如果你的化药在该方法中,灵敏度不够高,而又要求测定出一定量的杂质,如0.5%,而浓溶液又得不到,则有可能你要换方法,或者改良现有的方法。

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  • 生活就这么美好

    第9楼2013/09/15

    看来还是不那么容易丁啊

    tianru的爸爸(lxdongzi2003) 发表:进样量是根据分析方法来确定的。

    如果做含量分析:根据线性方程的上下限确定。

    如果是杂质的限量方法:根据限量的值来定,如,

    SE-HPLC分析蛋白溶液,正常上样量要求不少于20微克或者不少于20微升(最大不超过100微升),目的是控制上样体积在20-100微升之间,蛋白量在20-100微克之间。而一般要求杂质在1%之下,则理论上要600纳克蛋白(杂蛋白,也可以是有关物质),而这个200纳克,就是因为一般SE-HPLC的定量下限就在100纳克,所以有200纳克就可以定量,同样也可以用在限量上。实际上是根据分析方法来倒推计算的。

    ——因为分析方法确定了最低检测100纳克(杂质),而按照要求杂质超过1%要报告,所以总上样量不少于10微克,至于浓度,是因为分析方法一般上样量不超过100微升,所以要控制一定的浓度,一般控制在1mg/ml附近:最后确定上样量为不少于20微克,上样体积不少于20微升。(如果浓度过高就稀释后再分析。)

    如果换成化药,同样的道理:如果做杂质分析,先确定杂质比例(就是要报告、计算的比例),再确定方法的最低定量限(最好就是该杂质的),或者检测限,根据这些计算上样量的最低值,再确认分析方法的处理体积(色谱分析就是每次的上样量),确定最低浓度,最好确定一个好操作、好记忆的量。

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  • 生活就这么美好

    第10楼2013/09/15

    是进样量吗?

    zzz23010402(zzz23010402) 发表:一般根据仪器的灵敏度定吧~化药10或100吧

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  • 青林

    第11楼2013/09/18

    根据仪器的灵敏度(或最低检测限)来定

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