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请问大家SDS-PAGE和CE-SDS的异同点在哪里呢?

  • poxiao2012
    2013/10/12
  • 私聊

毛细管电泳(CE)

  • 求助求助啊,请问大家这两者的异同点,还有CE-SDS和SDS-PAGE比的优缺点在哪里呢?谢谢了啊
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  • spencer303

    第1楼2013/10/12

    前面测小分子,后面测蛋白的

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  • spencer303

    第2楼2013/10/12

    分离原理是一样滴,都是加入SDS使样品带负电

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  • chx229

    第3楼2013/10/15

    CE-SDS和SDS-PAGE的原理相同,样品前处理的方法也一样。都是按照分子量大小分离蛋白的。前者是使用液态胶在毛细管中进行的分离,电压高,所以分离效率优于SDS-PAGE,而且完全实现了自动化,现在在生产蛋白药的药厂里都开始用CE-SDS取代SDS-PAGE做产品质控了。

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  • cpudaxiao

    第4楼2013/10/15

    CE的管子内径为微米级别的,因此,CE 的分辨率是SDS-PAGE的许多倍。这个符合色谱的分离原理,即展宽很小。

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  • nini2006

    第6楼2013/10/16

    虽然都是用SDS但不是一回事的。
    SDS在CE里面是形成一个个小的胶束团是以胶束的形式存在,分析物质的分离是通过在胶束相和水相中不断分配实现的,胶束和分析物质的电荷共同影响了分离。一般的有机物都能用该模式进行分离,范围广。

    SDS-PAGE中因为有聚丙烯酰胺的存在,SDS已经成胶,分析物没了CE中的两相分配问题,只是按照分子大小来进行分离。主要用来分离蛋白质。应用范围小很多。

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  • cpudaxiao

    第7楼2013/10/16

    这个可以理解为CE中的SDS应该是在低于CMC浓度下进行的,CMC是胶束形成临界浓度。另外,SDS-PEG分离度低的很关键的原因是电压太低,只有不到一千付,而CE动辄十几KV,电压高产热效应太明显导致的。

    nini2006(nini2006) 发表:虽然都是用SDS但不是一回事的。
    SDS在CE里面是形成一个个小的胶束团是以胶束的形式存在,分析物质的分离是通过在胶束相和水相中不断分配实现的,胶束和分析物质的电荷共同影响了分离。一般的有机物都能用该模式进行分离,范围广。

    SDS-PAGE中因为有聚丙烯酰胺的存在,SDS已经成胶,分析物没了CE中的两相分配问题,只是按照分子大小来进行分离。主要用来分离蛋白质。应用范围小很多。

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  • nini2006

    第8楼2013/10/16

    不是的,CE所需的SDS浓度基本也要在CMC以上,这样才能形成胶束(成了胶束的溶液也还是液态的,如果没有泡沫,看起来跟一般的溶液没啥区别)。而SDS-PAGE中之所以能成整块的胶,是因为有聚丙烯酰胺和引发其成胶的TEMED。

    cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:这个可以理解为CE中的SDS应该是在低于CMC浓度下进行的,CMC是胶束形成临界浓度。另外,SDS-PEG分离度低的很关键的原因是电压太低,只有不到一千付,而CE动辄十几KV,电压高产热效应太明显导致的。

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  • cpudaxiao

    第9楼2013/10/16

    这个值得商榷一下。在CMC以下为CZE区带电泳,在CZE以上为胶束电泳为“MECC”。分离的原理与作用力是不同的。

    nini2006(nini2006) 发表:不是的,CE所需的SDS浓度基本也要在CMC以上,这样才能形成胶束(成了胶束的溶液也还是液态的,如果没有泡沫,看起来跟一般的溶液没啥区别)。而SDS-PAGE中之所以能成整块的胶,是因为有聚丙烯酰胺和引发其成胶的TEMED。

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  • wy20071722

    第10楼2013/10/17

    赞同!不是所有加SDS的CE都是MECC的

    cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:这个值得商榷一下。在CMC以下为CZE区带电泳,在CZE以上为胶束电泳为“MECC”。分离的原理与作用力是不同的。

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  • wy20071722

    第11楼2013/10/17

    求教:为什么内径小分辨率就高?学的时候就不是很理解,可以通俗的解释一下吗?

    cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:CE的管子内径为微米级别的,因此,CE 的分辨率是SDS-PAGE的许多倍。这个符合色谱的分离原理,即展宽很小。

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