洁净室（微生物实验室）标准及洁净度分级解析

智慧的弟弟

2013/10/14
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洁净室（微生物实验室）标准及洁净度分级解析

微生物实验室一般包括清洁区、操作区和无菌区三个区域，可划分为准备室、培养室、菌种室、消毒室、无菌室等多个房间。微生物实验室根据专业领域（环保、食品、药品、医学等）和性质（教学、生产、科研、检测等）的不同，实验室的组成和规模有较大差别。

目前，中国没有专门的微生物实验室的设计建设标准，来对无菌室等的洁净度和空气沉降菌落数进行规范。空气中绝大多细菌直径0.5～5μm，霉菌直径2～30μm，在空中附着在尘埃上，形成一定粒径的生物性粒子而悬浮，直接影响微生物实验室空气环境。

在微生物实验室规划、设计和建设中，空气洁净度成为最关键的因素。目前，中国主要洁净室及洁净度分级的标准和文件如下：

1)GB 50073-2013《洁净厂房设计规范》

2)GB/T25915.1-2010《洁净室及相关受控环境　第1部分：空气洁净度等级》

3)GB 50687-2011《食品工业洁净用房建筑技术规范》

4)GB 50472-2008《电子工业洁净厂房设计规范》

5)GB 50457-2008《医药工业洁净厂房设计规范》

6)YY 0033-2000《无菌医疗器具生产管理规范》

7)《药品生产质量管理规范（2010年修订）》附录1

8)《医疗器械生产质量管理规范无菌医疗器械实施细则和检查评定标准（试行）》

对于医药、电子和食品等行业还好说，有对应的标准。其他行业该怎么选择？有人说直接选择GB 50073-2013，我个人觉得不尽然。GB 50073-2013仅仅规定了悬浮颗粒物的要求，并没有对无菌实验室影响最大的微生物指标作出规定，如果你所在实验室仅仅控制悬浮颗粒物就可以，那参考GB 50073-2013完全可以满足要求，如果对微生物指标还有控制要求，那应该怎么选择呢？我们先来看看上述标准和文件对洁净度的主要分级：

GB 50073-2013和GB/T 25915.1-2010均参考的ISO的标准分级，对洁净室空气洁净度的分级如下：

洁净室及洁净区空气中悬浮粒子洁净度等级

注：GB 50472-2008是参考GB 50073-2013分级标准，自身没有规定相应的分级。

GB 50457-2008《医药工业洁净厂房设计规范》关于洁净度的等级规定如下：

洁净度	尘粒最大允许数／立方米		微生物最大允许数
洁净度	≥0.5m	≥5m	浮游菌／立方米	沉降菌／皿
100级	3 500	0	5	l
10 000级	350 000	2 000	100	3
100 000级	3 500 000	20 000	500	10
300 000级	10 500 000	60 000	—	15

注：GB 50457-2008的要求是直接引用1998版GMP，其中YY 0033-2000《无菌医疗器具生产管理规范》和《医疗器械生产质量管理规范无菌医疗器械实施细则和检查评定标准（试行）》的要求与之等同。

《药品生产质量管理规范（2010年修订）》关于无菌操作洁净度的等级规定如下：

洁净室各级别空气悬浮粒子的标准

洁净度级别	悬浮粒子最大允许数/立方米
	静态		动态
	≥0.5μm	≥5.0μm⁽²⁾	≥0.5μm	≥5.0μm
A级	3520	20	3520	20
B级	3520	29	352000	2900
C级	352000	2900	3520000	29000
D级	3520000	29000	—	—

洁净室微生物监测的动态标准

洁净度级别	浮游菌 cfu/m³	沉降菌（f90mm） cfu /4小时	表面微生物
洁净度级别	浮游菌 cfu/m³	沉降菌（f90mm） cfu /4小时	接触（f55mm） cfu /碟	5指手套 cfu /手套
A级	<1	<1	<1	<1
B级	10	5	5	5
C级	100	50	25	－
D级	200	100	50	－

注：GMP(2010)关于洁净度等级划分系参考EU GMP进行修订的。

GB 50687-2011的分级基本与GMP（2010），只是级别的名称改成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，而且GMP（2010）要求更为严格。GMP（2010）对浮游菌和沉降菌只做动态监测，GB 50687-2011则静态和动态监测都有。

那么微生物实验室设计和建设到底该参考那个标准呢？这就要根据不同专业领域及不同样品检测的风险而定了。我们不盲选择，先将他们来做个对比。

1）以GB 50073-2013和GB/T 25915.1-2010的等级为依据，即ISO的等级划分，以悬浮粒子为限度标准。

2）GMP（2010）的A级相当于ISO的4.8级，4.8级是以≥5.0μm的悬浮粒子为限度标准通过公式计算得来。

3）GMP（2010）B级、GB 50687-2011的Ⅰ级（静态）和GB 50478-2008的100级相当于 ISO的5级，也即我们常说的100级。

4）GB 50687-2011的Ⅰ级（动态）相当于ISO的6级，也即我们常说的1000级。

5）GMP（2010）C级（静态）、GB 50687-2011的Ⅱ级（静态）和GB 50478-2008的10000级相当于ISO的7级，也即我们常说的10000级。

6）GMP（2010）的C级（动态）/D级、GB 50687-2011的Ⅱ级（动态）/Ⅲ级（静态）和GB 50478-2008的100000级相当于ISO的8级，也即我们常说的100000级。

7）GB 50687-2011的Ⅳ级相当于ISO的9级。

综上所述，由于ISO标准仅仅规定了悬浮粒子的要求，对微生物指标并没有进行限定，所以建议：对没有微生物指标限制的洁净室可参考GB 50073-2013或GB/T 25915.1-2010的要求，食品、电子、医药等领域参考对应行业的标准，其他领域的微生物实验室应参考GMP（2010）的相关要求为宜。同时应结合检测样品的风险来确定微生物实验室的洁净度级别。

最后，附各国对洁净室洁净度对比（以下部分数据可能已经更新）。