样品和流动相pH不同为什么会出现2个峰，且峰形不好？

应助达人

离解常数（25℃）：Ka1=7.4×10-4，Ka2=1.7×10-5，Ka3=4.0×10-7
可能存在多种形式的状态，药典上待测组分的溶剂要求用什么？

谢谢有水有渝。

药典上要求就是用水溶解标准品的，pH就在7左右，所以很奇怪，难道药典有错误？？

有可能水里有杂质带入的，一般要求都是流动相去稀释样品

楼主的标样就是用水溶解的吗？如果不是，也有可能是溶剂效应。

其实样品不用流动相溶解的方法多了去了，就是药典里面，溶剂也有很多很奇怪的。我们以前开发方法就首选用甲醇或乙腈做溶剂，溶解性不好或有溶剂效应才改用其他的。因为溶剂还会影响样品溶液的稳定性。

我是完全按药典方法，用水溶解的枸橼酸钠标准品，如果用流动相溶解标准品，不调整pH的话，会出现平头峰，很奇怪。

如果将标准品溶液调pH至和流动相一样，和药典要求又不一样，会被挑战。 不调整pH，流动相是磷酸盐缓冲液（pH2.0-2.5）应该可将标准液缓冲至pH2-2.5吧？

难道是因为离子的极性太大，用纯水溶解样品导致了“反溶剂效应”？因为pH2.5时，枸橼酸基本没有电离，所以极性相对不大，而pH到7.0之后基本呈离子态，极性太大，这时候流动相中含有有机相，和溶剂的极性有一定差距，于是就产生了这现象吗？

纯属大胆的猜想啊，楼主有时间证实这个吗？

想了想，原因应该是这样的，就是用纯水溶解样品，样品呈离子态，进入到流动相中，解离平衡发生变化，在离子态和分子态之间变化，于是不能得到单一峰。

不过楼主有兴趣的话，可以试试用纯水溶液，然后加点有机相，看看能不能得到单一峰。