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【分享】平衡色谱柱的方法
zhouyan007
2006/08/06
私聊
气相色谱(GC)
平衡色谱柱的方法
☆反相色谱柱:
在经过出厂测试后是保存在乙腈/水的流动相体系中的,
①在平衡之前,请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶;
②新柱应先以10-20倍柱体积的5%甲醇或纯乙腈作流动相冲洗色谱柱。
③如果您所使用的流动相中含有缓冲盐或离子对试剂,应注意在乙腈冲洗后用高比例水"过渡"。即每天分析开始前必须先用高比例水冲洗30分钟以上(防止盐析出),再用缓冲盐流动相平衡; 分析结束后必须先用高比例水冲洗30分钟以上,除去缓冲盐之后再用甲醇冲洗30分钟(保护柱子)。
☆硅胶柱或极性色谱柱
在经过出厂测试后是保存在正己烷的流动相体系中的,相对于反相色谱柱来说,需要更长的时间来平衡。如果极性色谱柱需要使用含水的流动相,请在使用流动相平衡之前用异丙醇平衡。即每天分析开始前必须先用异丙醇冲洗10-20倍柱体积,再换用流动相平衡; 分析结束后必须先用异丙醇冲洗10-20倍柱体积后再用正己烷冲洗30分钟(保护柱子)。
贴心提示:
①在确定分析样品的流动相时,要确保您使用的流动相和保存色谱柱的流动相互溶
②平衡过程中,将流速缓慢地提高,首先用低流速0.2ml/min将色谱柱平衡过夜(注意:断开检测器);然后,将流速增加到1ml/mol冲洗30分钟,以便将色谱柱的填料充分平衡至最佳状态。可以保证色谱柱的使用寿命,并且保证在以后的使用中,获得分析结果的重现性。
③再用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂的流速如果较低,则需要较长的时间来平衡)
④请注意将预柱和分析柱一起平衡
⑤每天用足够的时间以流动相来平衡色谱柱,您就会在处理问题方面获得最大的"补偿",而且您的色谱柱的寿命也会变得更长!
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