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急急急。。怎样分离硝化产物?

  • 星空和游侠
    2013/12/28
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 求助求助,希望专家们指点。。。

    近几天我们有个样品,是2.5-二氯苯酚,它的硝化产物有2.5-二氯-4硝基苯酚还有其它副产物。请问用HPLC怎样对它进行分离呢??我试了很多次了都不行。我的条件是流动相乙腈:水=70:30 流速0.8mL/min 波长230nm试验结果是分叉峰;我又用了50:50乙腈流动相还是不行;用乙腈:水=30:70还是不行,一样分叉峰;我又改用65:35的甲醇溶液 还是不行;又改为甲醇:0.1%的乙酸=65:35还是分叉峰。我用的是C18柱

    我确实做不出来了,请大家帮帮忙!!!
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  • 星空和游侠

    第1楼2013/12/28

    拜托拜托!!!!!!!!!!!!!

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  • 星空和游侠

    第2楼2013/12/28

    ?????????????????就我一个人在啊~~

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  • 老多_小多

    第3楼2013/12/28

    首先你要确定这个分叉峰是一个物质还是2个物质

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  • hnteng

    第4楼2013/12/29

      你做液相是乱摸条件啊。

      告诉你,可以系统地摸。

      用甲醇水系统就好了。首先用纯甲醇跑一下,再换到90%甲醇、80%甲醇,这样下去。每次隔十分百分点。
      你上面用到65%的甲醇不行的话,就换55:45。再不行就再降甲醇的比例。当然,为保峰形,可适当提高柱温。也可适当加乙酸,考虑到你物质有弱酸性。用乙酸=乙酸铵的缓冲盐似乎更好。
      不过,带硝基的,可能亦有一定的弱碱性,可能与残留的硅醇基发生作用。可适当加入极少量三乙胺封尾。

      从你的谱图上来看,你的物质出峰在2min以前,显然这根本不符合一个HPLC方法的基本规则!保留时间太靠前了!很可能你要测的物质与溶剂峰重合,或者受到了溶剂峰的干扰了。我一般分物质保留时间至少在3min以后。

      如此看来,你还得大大降低流动相中甲醇的比例,使你的物质获得相对较长的保留时间。这样你才有可能分开。

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  • 星空和游侠

    第5楼2014/01/02

    谢谢大家。我摸索出来了,结果我用的是0.1%的三氟乙酸水溶液和甲醇搞定的,结果是三个峰。

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  • 星空和游侠

    第6楼2014/01/02

    谢谢 我试试。甲醇和水粘度很大啊,泵压很高能达到30Mp,仪器报警了

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  • 星空和游侠

    第7楼2014/01/02

    谢谢 我试试。甲醇和水粘度很大啊,泵压很高能达到30Mp,仪器报警了

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  • 星空和游侠

    第8楼2014/01/02

    三个,我分出来了,谢谢

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