青贮饲料中有机酸的检测解决方案

微雨燕双飞

2014/05/27

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有机酸的含量与组成比例是确定青贮饲料发酵特性和评价青贮品质的重要指标。青贮饲料质量的好坏取决于乳酸菌作用，乳酸是乳酸菌的主要产物，其含量是反映青贮饲料质量最重要的指标，乙酸的生成量与青贮饲料品质呈负相关，丙酸可以抑制真菌繁殖，防止二次发酵，丁酸由酪酸菌产生，可直接反应青贮饲料的腐败程度。

方法优势

迪马科技建立青贮饲料中有机酸的解决方案，采用ProElut PSA固相萃取柱，盐酸水溶液洗脱，本方案简化前处理步骤，不使用有机溶剂，减少人体伤害，降低实验成本，节省大量时间，并减少杂质的干扰，回收率达80%以上。

以下为详细解决方案，敬请参考！

1、适用范围

适用于饲料中乳酸、乙酸、丙酸和丁酸的检测。

2、样品准备

(1) 取10 g样品，加入90 mL水，充分混匀，超声提取30 min浸泡过夜；
(2) 取出上层清液进行过滤，收集滤液，待净化。

3、SPE柱净化——ProElut PSA 500 mg/6 mL (Cat.#：63205)

(1) 活化：	依次向柱中加入5 mL甲醇、5 mL水，弃去流出液；
(2) 上样：	取1 mL待净化液加入柱中，弃去流出液；
(3) 淋洗：	向柱中加入5 mL水，弃去流出液；
(4) 洗脱：	向柱中加入5 mL 0.5 mol/L 盐酸水溶液，收集流出液；
(5) 定容：	将洗脱液用水定容至5 mL，供HPLC分析。

4、分析条件

色谱柱：	Suprsil C18，150 mm × 4.6 mm，5 μm（Cat# 82001）
流速：	1.0 mL/min
检测器：	UV 214 nm
柱温：	30 ℃
进样量：	20 μL
流动相：	25 mmol/L 磷酸二氢钾水溶液，用磷酸调pH至2.5

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第1楼2014/05/27

5、添加回收结果

饲料中有机酸添加回收结果

NO.	化合物名称	添加水平（mg/kg）	回收率（%）
1	乳酸	500	119.92
2	乙酸	200	112.27
3	丙酸	500	92.27
4	丁酸	1000	86.72

青贮饲料中有机酸的检测相关产品信息：

货号	名称	规格
样品前处理
63205	ProElut PSA	500 mg/6 mL 30/pk
244358	12管防交叉污染真空SPE萃取装置	12位
4803	1,3,6mL柱管通用连接器	15/pk
4806	考克(控制流量)	15/pk
99011	真空/正压两用泵，无油	1/pk
99013	抽滤瓶套装 (包括硅橡胶管2米,2L抽滤瓶及橡胶塞)	1/pk
37177	针头式过滤器 Nylon	13 mm,0.22 μm 100/pk
37180	针头式过滤器 Nylon	13 mm,0.45 μm 100/pk
色谱柱及保护柱
82001	极性改性通用型反相色谱柱 Spursil C18	150 × 4.6 mm，5 μm
6221	EasyGuard保护柱柱套	适合 10 mm 柱芯，1/pk
6803	Spursil C18保护柱柱芯	5 μm, 10 x 4.0 mm 2/pk
标准品
12-N-12303-2G	乳酸[50-21-5]	2 g
12-N-11011-10G	乙酸[64-19-7]	10 g
12-N-13115-10G	丙酸[79-09-4]	10 g
12-N-11388-10G	丁酸[107-92-6]	10 g
HPLC溶剂缓冲盐离子对试剂
50102	甲醇HPLC级	4 L
50159	磷酸二氢钾, 无水HPLC级	100 g
50133	磷酸 HPLC级	50 mL
通用色谱产品
52401B	瓶架/蓝色	50 孔
52401A	瓶架/白色	50孔
5323	样品瓶（棕色/螺纹）	2 mL, 100/pk
5325	样品瓶盖/含垫（已经组装）	100/pk
H80465	HPLC 进样针	25 μL