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关于液质基线高

液质联用(LCMS)

  • 现在在做一个分子量较小的硫酸酯分析,发现基线非常高。在这里问一下,看是否能有网友帮忙分析解决一下。

    仪器是Shimadzu lc-20 + AB qtrap 4000,ESI源,MRM模式,使用的流动相是加了甲酸的水与乙腈,采用MW->97(高)和MW->80,分别是SO4H-和SO3H-的峰,这里见谅把母离子隐去。

    不接柱子,使用两通,使用相同的水(屈臣氏蒸馏水过滤),如果不加甲酸,MW->97基线(红色)在500-800左右(图1),加入甲酸的话升到4000左右(图2),那条蓝色的是MW->80。甲酸应该没有问题,请问这可能是什么原因?会不会是因为下面我说的orifate plate上的黄色东西的原因?还是因为整个液相体系不干净的原因?还是流动相的原因?而且在以前最好的时候可以达到200左右。



    图1



    图2

    我还发现orifate plate上有非常多的黄色物质,我用无尘纸沾异丙醇,水,甲醇洗,洗不掉,我们平时做血尿等样品比较多,是不是这些基质留下来的(图3,4)?这个能擦掉么?



    图3



    图4

    而且,人血尿中还有非常多的硫酸酯泪,那么如果这个黄色物质里包裹者一些含有硫酸酯一类的东西,使用含有酸的流动相会不会让结果中的基线升高?

    最近因为这个基线问题,捣鼓一个月了,问题比较多,谢谢了!
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  • 八杯水

    第1楼2014/06/27

    orifate plate这个部件允许砂纸打磨吗?

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  • yzulcl

    第2楼2014/06/27

    应助达人

    Agilent的这个锥是可以拆下来打磨的(千万别在机器上原位打磨,会出大事的)。
    用的是一种很高目数的砂纸(具体多少目数不知道,没问过工程师),反正手摸上去完全感觉不到一丝一毫的粗糙感,是随仪器原配的。

    打磨过以后,用溶剂多超声几次,确保没有颗粒残留,然后擦干净就可以装回去了。

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  • 小丶风

    第3楼2014/06/27

    那个黄色的能抹掉,不知道你们有没有安捷伦的气质,用安捷伦的打磨砂纸就行
    不过这个貌似影响不是特别大,我们的也是这样的,高温烤的。。
    也可以用金属抛光剂来磨掉它,不过磨完了需要用正己烷泡掉,因为抛光剂是油性的
    你可以给质谱调谐下,看看是不是仪器脏的原因,PPG调谐Q1和Q3,运行时间设置5min左右,看总离子流是否呈现往下掉的趋势,如果TIC一直是直线,能够说明质谱不脏,如果TIC图呈下降趋势,说明四级杆有污染、、、该清洗了
    另外,基线这么高,看下离子源喷雾针部分是否有蓝色电火花,看看是否离子源放电了,如果放电了,好好清洗下离子源。

    我们用的3200,据工程师说4000的oriface开孔比较大,四级杆是比较容易脏的

    不知道你运行别的项目基线怎么样,有可能你这个物质的响应值就是低,所以基线高。

    总之,先排除质谱的问题,质谱没有问题,再找找液相部分,包括你优化出来的离子对是否有问题。

    目前只能想到这么多。。。

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  • jiangshi1943

    第4楼2014/07/01

    看来甲酸能把残留冲出来,如果没有砂纸打磨的话,可以拆下来甲酸水超声洗洗,再水洗,甲醇洗

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  • gut

    第5楼2014/07/01

    谢谢!

    yzulcl(yzulcl) 发表:Agilent的这个锥是可以拆下来打磨的(千万别在机器上原位打磨,会出大事的)。
    用的是一种很高目数的砂纸(具体多少目数不知道,没问过工程师),反正手摸上去完全感觉不到一丝一毫的粗糙感,是随仪器原配的。

    打磨过以后,用溶剂多超声几次,确保没有颗粒残留,然后擦干净就可以装回去了。

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  • gut

    第6楼2014/07/01

    谢谢!

    小丶风(yujianlin) 发表:那个黄色的能抹掉,不知道你们有没有安捷伦的气质,用安捷伦的打磨砂纸就行
    不过这个貌似影响不是特别大,我们的也是这样的,高温烤的。。
    也可以用金属抛光剂来磨掉它,不过磨完了需要用正己烷泡掉,因为抛光剂是油性的
    你可以给质谱调谐下,看看是不是仪器脏的原因,PPG调谐Q1和Q3,运行时间设置5min左右,看总离子流是否呈现往下掉的趋势,如果TIC一直是直线,能够说明质谱不脏,如果TIC图呈下降趋势,说明四级杆有污染、、、该清洗了
    另外,基线这么高,看下离子源喷雾针部分是否有蓝色电火花,看看是否离子源放电了,如果放电了,好好清洗下离子源。

    我们用的3200,据工程师说4000的oriface开孔比较大,四级杆是比较容易脏的

    不知道你运行别的项目基线怎么样,有可能你这个物质的响应值就是低,所以基线高。

    总之,先排除质谱的问题,质谱没有问题,再找找液相部分,包括你优化出来的离子对是否有问题。

    目前只能想到这么多。。。

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  • lzhwin

    第7楼2014/07/02

    问一下,测别的物质(离子对)也会这样吗?

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  • gut

    第8楼2014/07/03

    问题就是这个硫酸酯这样。

    其它的物质没什么问题。

    lzhwin(lzhwin) 发表:问一下,测别的物质(离子对)也会这样吗?

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  • 小猪飞飞

    第9楼2014/07/05

    是否跟该物质的MRM离子对有关?分子量过低,本身就容易受到较大的干扰

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  • imozi

    第10楼2014/07/21

    脏了,用酸基线升高,可以试试用加酸的水洗,当然先电话咨询工程师

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