GC-MS检测奶粉中三聚氰胺

试样中的三聚氰胺用三氯乙酸溶液提取，经混合型阳离子交换固相萃取柱净化，用N，O-双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）衍生化，以气相色谱质谱联用仪进行定性和定量。

2 试剂和材料

2.1 衍生化试剂：BSTFA+1%三甲基氯硅烷（TMSC）。

2.2 吡啶：优级纯。

2.3 甲醇：色谱纯。

2.4 乙腈: 色谱纯。

2.5 氨水：25%-28%.

2.6 混合型阳离子交换固相萃取柱：P-SCX固相萃取柱（60mg/3 mL）；

2.7 三氯乙酸溶液10g/L。

2.8 氨水甲醇溶液：量取5ml氨水，溶解于100ml甲醇中。

2.9 乙酸铅溶液22g/L：取2.2g乙酸铅定容于100ml纯水中。

2.10 滤膜：0.45um，有机相。

2.11 甲醇溶液：200ml甲醇（2.3）加入800ml纯水中，混匀。

2.12 三聚氰胺标准品（纯度）99%）编号：BW3831。

2.13 三聚氰胺标准溶液

2.13.1 标准储备液：称取100mg（精确至0.1mg）的三聚氰胺标准品，用甲醇溶液（2.11）溶解并定容于100ml容量瓶中，该溶液浓度为1mg/ml，于4℃冰箱内储存，有效期3个月。

2.13.2 标准中间液：吸取标准储备液1ml于100ml容量瓶中，用甲醇溶液定容（2.11）至100ml，该溶液浓度为10ug/ml，于4℃冰箱内储存，有效期1周。

标准工作液：分别移取10ug/ml的标准中间液0.1ml，1ml,5ml,10ml于4个100ml容量瓶内，用甲醇（2.3）定容，该溶液中三聚氰胺浓度为：0.01ug/ml，0.1ug/ml，0.5ug/ml，1ug/ml。

2.14 仪器设备
2.15 气相色谱质谱联用仪：Aglient gc-7890A MS-5975

2.16 离心机：5000r/min。

2.17 涡旋混合器。

2.18 超声波清洗器。

2.19 氮吹仪，可控温50℃。

2.20 固相萃取装置。

2.21 烘箱。

2.22 移液枪。

2.23 粉碎机。

3 测定步骤

3.1 提取

称取5g试样（精确至0.01g），准确加入40ml三氯乙酸溶液（2.7），加入2.0ml乙酸铅溶液（2.9），定容至50mL。震荡摇匀，超声提取20分钟。静止2分钟，取上层清液约30ml转入离心管，在5000r/min离心机上离心15分钟。

3.2 净化

分别用3ml甲醇，3ml水活化混合型阳离子交换固相萃取柱，准确移取5.0ml离心液分次上柱，控制过柱流速在1ml/min以内。再用3ml水，3ml甲醇洗涤混合型阳离子交换固相萃取柱（P-SCX固相萃取柱（60mg/3 mL）抽尽干后用氨水甲醇溶液（2.8）3ml洗脱。洗脱液50℃氮吹仪吹干（约15分钟）。如需要稀释，准确加入甲醇溶液（2.11），涡旋振荡1min，过0.45um滤膜，取一定体积的溶液（3ml以内），50℃氮吹仪吹干（约15分钟）。

3.3 衍生化

3.4 取稀释液适量用氮气吹干，加入600ul的吡啶和200ul的衍生化试剂，混匀，烘箱内70℃恒温反应45分钟，同时三聚氰胺标准系列做同步衍生化。

3.5 测定

3.5.1 gc-MS条件

氦气流速：1.0ml/min；

进样量：1.0ul；

升温程序：起始温度为70℃，持续1.0min,以10℃/min.,升温到200℃,持续10min。

进样口温度：250℃

进样方式：不分流

运行时间：20分钟

质谱条件：

离子源温度：230℃

监测方式：SIM选择离子扫描模式。监测离子99m/z，171m/z，327m/z，342m/z。

3.5.2 测定定性方法：试样与标准品保留时间的相对偏差不大于0.5%，特征离子丰度与标准品相差不大于20%。

定量方法：以342，171，327，99峰面积和多点校正定量。

试样中三聚氰胺的含量X，以质量分数毫克每千克（mg/kg）表示：

X=Cx × V × n÷m

式中：

V：用于衍生溶液的体积（0.8mL）； Cx：由标准曲线而得的样液中三聚氰胺的含量，单位为微克每毫升(ug/ml) ；m：试样量，单位为克(g) ；：稀释倍数为50/5=10倍

第二次测得结果0.018*0.8*10/5=0.029 mg/kg；

故该样品为未检出，GB22388指出气质法的检测限为0.05 mg/kg。

加标回收试验（加入10ug/mL三聚氰胺标液0.8mL）：

加标回收率的计算:

（0.91*0.8*10-0.02*0.8*10）*100/（10*0.8）=89%

结论：

gc-MS法需要衍生化处理，但是灵敏度高，方法稳定； LC-MS/MS法不用衍生，但是基体干扰较为严重，通常需要建立一整套严格而又繁琐的样品净化步骤 。