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牛磺酸谱图

  • weiwei0423
    2014/08/28
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 上周发的帖子询问牛磺酸的衍生程序,然后查了些文献,终于搞定了,但是做出来的谱图很难看,现在想问问群里的专家,怎么调节试验条件,能让谱图好看点,谢谢

    首先是我目前的实验条件:基本是按照GB的方法,30ppm标准品溶液,流动相改为20%甲醇



    这个峰其实很宽,大概1.5-2min整个峰才出完,整个峰向右倾,改过流动相的PH值,只要加一点点HAC,牛磺酸的峰就不见了,换过柱子,峰型基本没有改善,或者峰变得很小
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  • 老多_小多

    第1楼2014/08/29

    衍生试剂不出峰?你图里没有啊

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  • bingwang228

    第2楼2014/08/29

    应助达人

    OPA衍生好像不出衍生试剂峰

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  • weiwei0423

    第3楼2014/08/29

    就这一个峰,如果把标液换成是水,这个峰就没有了,那这个峰应该就是牛磺酸和OPA衍生试剂反应后的产物吧?

    老多_小多(emoc98311) 发表:衍生试剂不出峰?你图里没有啊

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  • zhaohua8011

    第4楼2014/08/29

    换一根短点的色谱柱!

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  • bingwang228

    第5楼2014/08/29

    应助达人

    用OPA反应没有衍生试剂的峰,这个峰应该就是反应产物的色谱峰,如果不确定,可以做个标曲,看这个峰的响应是否能成线性。把浓度降低试试柱效能不能好一点

    weiwei0423(weiwei0423) 发表:就这一个峰,如果把标液换成是水,这个峰就没有了,那这个峰应该就是牛磺酸和OPA衍生试剂反应后的产物吧?

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  • 浪淘沙隐

    第6楼2014/08/29

    衍生后,流动相中加醋酸,保留发生巨大的变化,是说明这个物质对流动相的pH非常敏感吧。建议配制缓冲液,增加方法的耐用性,同时说不定峰形就好了。

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  • hujiangtao

    第7楼2014/08/29

    应助达人

    谱图还可以呀

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  • weiwei0423

    第8楼2014/08/29

    本来用的是GB标准里的那根柱子,好像是10um 3.9*250mm,后来换过5um 4.6*100mm和3.5um 4.6*100mm的柱子,峰都宽,大概整个出峰时间在1-1.5min,峰拖尾

    zhaohua8011(zhaohua8011) 发表:换一根短点的色谱柱!

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  • weiwei0423

    第9楼2014/08/29

    因为是2.5ul标液加2.5ul衍生试剂,然后进样量是5ul,进样量只有几十ng,差不多是GB里最低的浓度了。而且怎么都不明白,试验条件完全是GB的,进的是标液,标准上的那个峰是怎么做出来的?

    bingwang228(bingwang228) 发表:用OPA反应没有衍生试剂的峰,这个峰应该就是反应产物的色谱峰,如果不确定,可以做个标曲,看这个峰的响应是否能成线性。把浓度降低试试柱效能不能好一点

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  • bingwang228

    第10楼2014/08/29

    应助达人

    谱图显示的关系吧,标准里的响应值高,出峰时间晚,将谱图纵坐标往小了拉可能就能显得峰窄了

    weiwei0423(weiwei0423) 发表:因为是2.5ul标液加2.5ul衍生试剂,然后进样量是5ul,进样量只有几十ng,差不多是GB里最低的浓度了。而且怎么都不明白,试验条件完全是GB的,进的是标液,标准上的那个峰是怎么做出来的?

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