求助 柱子冲洗

应助达人

如何是色谱柱堵了那只能近色谱柱或用90%乙腈低流速冲洗，只要没有完全堵死，慢慢应该会好很多。

应助达人

换双通后压力下降明显，说明是色谱柱堵了造成的压力增加

你打电话给我。你可以先站短给我，我给你电话。你电话联系我吧。首先是什么柱， 还有，流动相是否过滤了？

色谱柱乙腈体系和甲醇体系的最好分开用。

应助达人

请教一下：甲醇和乙腈体系的为什么要分开？一直混用的

条件不足，无法分析。
怎么这么说呢：楼主一没给柱子型号，二没给流速，只是说了压力很高，怀疑“堵了”，但是12000psi的压力怎么来的没有说。

我们这用UPLC的经验来看，（甲醇：水=40:60）＞纯水＞乙腈、水。

甲醇和水混合后压力会有比较大的提升，等比例混合的时候压力最大，接近纯水的1.3倍，是纯乙腈的4倍以上。乙腈水混合的时候压力随着乙腈的比例提高而降低。

再给个参考压力（放假凭记忆），一般说0.4ml/min流速50mm的纯乙腈压力是1000到2000psi之间，纯甲醇是2000到3000psi，纯水接近5000psi。如果是1:1的甲醇水，压力接近7000psi。
如果放在100mm的柱子上，这个流速下用甲醇水会接近14000psi。用150mm的柱子，则会超过压力上限。

柱子 是 C18柱，2.1*50mm;1.7微米；0.2ml 纯甲醇冲5-6Kpsi;0.2ml 纯乙腈冲 4-5K psi；0.2ml 40:60甲醇：水，8-9K psi；0.3ml 40:60 甲醇 水，压力再11000-12000psi；我测得卡马西平标液，用0.4ml流量的40:60=甲醇：水，压力很快就达15000psi上限，报警停机了。我洗脱了好几天，偶尔压力下来了，感觉低了1-2Kpsi，一上样品又崩溃了 压力立马飙升报警。不知道哪里出问题了。我初学液相，承蒙指点！

以前有一款色谱柱，用完甲醇体系的流动相，再用乙腈水的流动相，色谱柱很快就报废了。

把参数一说，问题就会比较明显了。

柱子压力偏高了很多，而样品和流动相的过滤则可能是引起柱子堵的原因。

上机样品和校准样应该是有用一次性注射器打过0.22滤膜吧？流动相尤其是含水含盐的流动相也是一定要抽滤的。不然柱子压力会越走越高，严重的流动相问题更可能会损坏仪器。

具体可以参考UPLC H-class的操作规程，相信你会清晰很多。