如何正确选择和使用液相保护柱

应助达人

保护柱最好与当前所接的色谱柱填料一致，粒径与孔径比分析柱略小。

应助达人

填料一致是否就是C18对应C18,NH2对应NH2，有没有改性过需要考虑吗？粒径和孔径小是为了更好的吸附颗粒杂质？

基本上都是使用分析柱相同填料粒径完全相同的保护柱。柱子一般使用一年/3w针，使用两根保护柱。

ps.曾有同事尝试过C18的保护柱NH2的分析柱，结果出现双头峰。
推测可能是因为两种不同保留基体不匹配造成的。实际效果不如在线过滤器。

应助达人

保护柱的填料和色谱柱的填料需要是一个品牌的吗

我们单位3.5μm4.5μm粒径的分析柱就用第三方通用的型的保护柱，这种保护柱有2.5μm、3.5μm两种颗粒大小，类型有C18和氨基柱。

UPLC的分析柱就只能用原厂的保护柱了。和分析柱一样的填料。

应助达人

保护柱在使用中有什么注意事项呢？如何清洗？

应助达人

粒径与孔径至少不能比分析柱大，大就起不到较好的保护作用了，什么性质填料的保护柱直接与后面接的分析柱一起清洗就行了，无须单独处理，当然保护柱失效后的特殊处理除外。

应助达人

使用完毕后充分的系统冲洗平衡很重要。

按我的理解，保护柱的最佳模式应该是和分析柱一样的填料与粒径，可以在色谱柱前端遇到一些强保留杂质和意外/非意外的杂质颗粒时起到李代桃僵的效果。（堵了只要换保护柱就行，而大颗粒大多是未过滤的样品，样品变质沉降或者是在流动相中溶解度低的析出盐）

大部分的分析柱使用一段时间后柱子前端一般会沉积杂质，久了已后柱压上升柱效下降。

保护柱价格低廉，使用一段时间后或在压力过高出问题的时候换掉，有效的延长了分析柱的使用寿命。

使用保护柱也不能使分析柱寿命无限延长，色谱柱只要有使用，就一定会有柱流失，到了一定程度柱效也会达不到要求。只是好的色谱柱寿命会长一些。

概括的说，保护柱确实可以有效的保护色谱柱，阻挡各因素柱子堵塞对分析柱的伤害。保留住强保留杂质，延长色谱柱使用寿命。但填料流失造成的柱效损失即使使用保护柱也同时存在。

保护柱是好用，但是用不用也是个问题？HPLC的那种换芯保护柱怎么也要一千多软妹币，UPLC的就更贵了。如果分析柱价格本身不高的话，可能还不如买两根分析柱换着用呢。