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关于奶粉检测黄曲霉毒素M1时的过滤问题！！！！

神在洛城

2014/10/24

液相色谱（LC）

赏
悬赏金额:10积分状态:已解决

我做的是高效液相色谱，大致的步骤是，称10g全脂乳粉，用50℃温水溶解定容至100mL容量瓶中，倒入50mL离心管中离心11000r/min 10min，再用漏斗过滤至50mL量筒中收集滤液，待免疫亲和柱过滤。用快速滤纸过滤就很慢很慢了，有时好不容易收集了滤液上免疫亲和柱也容易堵，想问一下大家怎么能提高过滤速度，是要多离心几次吗？还是要加乙酸铅沉淀蛋白呢？要是加的话要加多少浓度多少毫升呢？加乙酸铅会不会对黄曲霉毒素M1有影响呢？

夏天的雪 2014/10/25

可以参看免疫亲和柱里的使用说明书，说明书里针对不同样品会有相应的样品前处理过程，可以参看。国标GB/T 23212-2008中是用冷冻离心后过滤的。蛋白质沉淀剂没有尝试过，可以进行加标看回收率。

分
该帖子已被版主-夏天的雪加2积分，加2经验;加分理由:悬赏补贴

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夏天的雪

第1楼2014/10/25

应助达人

可以参看免疫亲和柱里的使用说明书，说明书里针对不同样品会有相应的样品前处理过程，可以参看。国标GB/T 23212-2008中是用冷冻离心后过滤的。蛋白质沉淀剂没有尝试过，可以进行加标看回收率。

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神在洛城

第2楼2014/10/25

谢谢您。我会去参考一下的！
夏天的雪(bingwang228) 发表:可以参看免疫亲和柱里的使用说明书，说明书里针对不同样品会有相应的样品前处理过程，可以参看。国标GB/T 23212-2008中是用冷冻离心后过滤的。蛋白质沉淀剂没有尝试过，可以进行加标看回收率。

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wangku

第3楼2014/10/26

你这样处理应该不会过的太慢，奶粉是慢点，过免疫柱我们一般也得30到60分钟，中间过得慢，可以用根细的吸管伸到免疫柱里捏几下，让空气把沉淀震起来，会快一点。

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神在洛城

第4楼2014/10/26

谢谢您。我明天就试试希望能成功。嘻嘻。
wangku(wangku) 发表:你这样处理应该不会过的太慢，奶粉是慢点，过免疫柱我们一般也得30到60分钟，中间过得慢，可以用根细的吸管伸到免疫柱里捏几下，让空气把沉淀震起来，会快一点。

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wslmpol

第5楼2014/10/27

蛋白质沉淀用氰化钾和硫酸锌比较好吧。

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神在洛城

第6楼2014/10/27

谢谢你
wslmpol(wslmpol) 发表:蛋白质沉淀用氰化钾和硫酸锌比较好吧。

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苏微

第7楼2014/11/07

用的什么规格的亲和柱？过样慢的话可以用针筒打的，或者用气流架。3ml的话可能要用个转接头

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神在洛城

第8楼2014/11/10

恩恩。谢谢啦。已经算是解决了。就是缺了超声样品的步骤。
苏微(v2956376) 发表:用的什么规格的亲和柱？过样慢的话可以用针筒打的，或者用气流架。3ml的话可能要用个转接头

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