乳制品中黄曲霉毒素M1检测

乳制品中黄曲霉毒素M1检测

黄曲霉毒素是一种强致癌物，它广泛存在于食品、药品、饲料、乳制品等中，尤其是发霉或变质了的产品。严重的影响着我们消费者的身体健康和生活质量。

现在社会各个阶层都非常重视这个问题，很多行业也都在研究和制定着本行业的方法和标准。限量检测要求也越来越高，越来越严。

下面我们先来介绍下高效液相色谱法，荧光检测器检测乳制品中黄曲霉毒素M1含量的检测吧。

实验部分

1.适应性：该方法适用于牛奶、奶粉、乳酪等乳制品中黄曲霉毒素M1的检测。

2.检测原理

样品经溶解、振动、离心、固相萃取等提取后，由进样器进入高效液相色谱系统，C18色谱柱分离，荧光检测器检测，保留时间定性，峰面积定量（外标法）计算。

3.设备及试剂

设备：高效液相色谱仪（等度泵+荧光检测器+进样器+C18色谱柱+柱温箱等），超声波清洗仪，溶剂过滤器，涡旋振动仪，离心机（大于等于4000rpm），分析天平，固相萃取装置（包括专业的净化柱），氮吹仪等。

试剂：乙腈（色谱纯），无水乙醇（分析纯），超纯水等。

4.样品提取及制备牛奶、原料乳等液态奶制备：准确称取5g样品置于具塞离心管中，加入5mL乙腈，涡旋混合1min； 再加入10mL乙腈，涡旋混合1 min，4000rpm离心机离心5min； 取上清液5mL，作为上样液待净化。

奶粉、乳酪等固体奶制备：准确称取2g样品置于具塞离心管中，加入5mL水，涡旋混合2min，使样品与水充分混匀； 加入5mL乙腈，涡旋混合1 min； 再加入10mL乙腈，涡旋混合1min，4000rpm离心机离心5min； 取上清液5mL，作为上样液待净化。

SPE柱净化（固相萃取）及洗脱

A.净化柱（黄曲霉毒素净化专用柱）活化：缓慢加入10mL乙腈，弃去流出液；

B.上样液过柱：将上样液缓慢加入净化柱中，收集流出液；

C.洗脱：缓慢加入10mL乙腈，洗脱净化柱，收集流出液。合并步骤B、C收集液。

样品最后处理

A.氮吹仪浓缩：50℃氮吹仪浓缩收集液浓缩至大约2mL；

B.稀释：向浓缩液中加入5mL无水乙醇，摇匀；

C.再次氮吹仪浓缩：50℃氮吹仪将样品浓缩至近干。

样品定容

将浓缩后的样品用10%乙腈定容至1mL，待测。

5.色谱条件

检测器：荧光检测器

色谱柱：Diamonsil C18（2），250 mm X 4.6 mm，5μm色谱柱

检测波长：Ex:365 nm；Em:435 nm

流动相：乙腈：水=25：75

流速：1.0mL/min

柱温：30℃

进样量：20 μL

6.色谱图

标准品色谱图：

奶粉样品色谱图:

7.检测结果

以上分别采用该方法检测了牛奶样品及奶粉样品中黄曲霉毒素M1含量，结果显示这两种样品中基本（无明显色谱峰）不含该成分。由于样品成分较复杂，色谱图中色谱峰较多，既使采用了非常理想的前处理方法，也没能完全避免干扰物对检测的影响，不过还好对目标物的影响较小。

8.结论

该方法检测以上样品具有准确、可靠，灵敏、稳定，方便、快捷等优势，是一种非常理想的检测方法。该方法成功的重要因素在于选择一款优良的色谱柱及专业的净化柱；前处理过程尽量缓慢，操作尽量认真，切不可匆忙行事，目的是为了保证既能去除样品中的干扰物又能减少目标物的损耗（当然这个实现起来非常难）。

黄曲霉毒素对人类的毒害是非常强烈的，现已越来越被重视，检测方法也是层出不穷，各有优势。为了工作，为了身体，我们应该多了解些这方面的相关知识，多加防范，多加注意，多加避免。

该方法检测黄曲霉毒素只供参考，模仿需谨慎。