果粒饮料中维生素B12检测
简介
维生素B12是所有维生素最后被发现的,分子构成非常复杂,是新型维生素。该维生素被称为造血维生素,具有造血、肌肤再生等药物功效,细胞再生与造血离不开它,是促进人体新陈代谢的重要成分。 人体中维生素B12含量会随着年龄的增加而逐渐减少,特别是女性因生理结构会减少的较快。 缺乏该维生素会导致DNA合成障碍,干扰红细胞成熟等影响身体健康。但过量摄入维生素B12同样不好,也会产生很多毒副作用所以限量很重要。食品、药品、保健品、化妆品中都含有维生素B12,现在也逐渐被加入检测行列。
下面介绍果粒饮料高效液相色谱检测。
试样处理
将果粒饮料用1mol/L氢氧化钠溶液调PH至7.0,置离心机以不低于转速4000r/min离心10min,过滤,收集滤液待用。
净化:分别用纯水及甲醇维生素B12免疫亲和净化柱。
富集:将上面收集到的滤液缓慢过净化后维生素B12免疫亲和净化柱使样品富集于净化柱内。
洗脱:加入适量(一般为5ml)甲醇加入净化柱中,以1mL/min流速洗脱。
收集全部洗脱液于玻璃试管中,氮吹仪吹干,定容1ml,0.45um微膜过滤,待测。
色谱条件
检测器:紫外检测器
色谱柱C18(4.6mm*250mm,5um)色谱柱
流动相:A:乙腈, B:0.025%三氟乙酸(pH=2.6 )
流速1mL/min
检测波长:360nm
柱温:30℃
进样量:20uL
梯度洗表:
序号 | 时间(min) | A(%) | B(%) |
1 | 0 | 0 | 100 |
2 | 3.5 | 0 | 100 |
3 | 11 | 25 | 75 |
4 | 19 | 35 | 65 |
5 | 20 | 10 | 90 |
6 | 30 | 0 | 100 |
7 | 35 | 0 | 100 |
标准品色谱图:
样品色谱图:
结论
从以上色谱图可以看出色谱图峰形漂亮,分离度好,实验结果数据也表明该方法检测该样品数据准确、可靠,操作方便,过程快捷。
该方法适合检测果粒饮料中维生素B12,当然有人可能觉得检测时间长,灵敏度低等,缩短调整色谱条件效果会更佳。
该方法可以作为其它食品及其它物品中维生素B12检测的参考方法