【许愿原创】中药材威灵仙高效液相色谱检测

中药材威灵仙高效液相色谱检测


中药材威灵仙为毛莨科植物威灵仙、棉团铁线莲或东北铁线莲的干燥根和根茎。到秋季采挖，清水冲洗除去泥沙，晒干。

本品具有祛风除湿、通络止痛、消痰水、散癖积功效。主治痛风顽痹、风湿痹痛、肢体麻木、腰膝冷痛、筋脉拘挛、屈伸不利、脚气疟疾、症瘕积聚、扁桃体炎、诸骨鲠咽、脚气肿痛、骨哽咽喉、痰饮积聚、破伤风、食管癌等多种病症。

下面介绍该药材中齐墩果酸、常春藤皂苷元高效液相色谱法检测。

仪器及试剂

仪器：高效液相色谱仪（紫外检测器+高压恒流泵+柱温箱+C18色谱柱+自动进样器等），四号药典筛，锁氏提取器，恒温水域，氮吹仪，超声波，溶剂过滤器，电子天平等。

试剂：乙腈（色谱纯），甲醇（色谱纯），乙酸乙酯，乙醇，盐酸，超纯水等。

样品制备

对照品溶液制备：精密称取齐墩果酸(C30H48O3)对照品、常春藤皂苷元(C30H48O4)对照品各10mg于10ml容量瓶中，加甲醇溶解并至刻度，配制成含1mg/ml的齐墩果酸对照品、常春藤皂苷元混合标准品溶液，备用。

供试品溶液制备：取药材威灵仙适量，充分粉碎后过四号筛（药典筛），精密称取过筛后粉末4g，置于索氏提取器中，加乙酸乙酯适量，加热回流3小时，弃去乙酸乙酯液，药渣挥干溶剂，连同滤纸筒转移至锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再次称定重量，用稀乙醇补足减少的重量，摇匀，0.45um有机相微膜滤过，精密量取续滤液25ml，置水浴上蒸干，残渣加2mol／L盐酸溶液30ml使溶解，加热回流2小时。立即冷却，移入分液漏斗中，用水10ml分次洗涤容器，洗液并入分液漏斗中。加乙酸乙酯振摇提取3次，每次15ml，合并乙酸乙酯液，氮吹仪浓缩至近干，加甲醇溶解，并转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，再次经0.45um有机相微膜滤过，待测。

色谱条件

检测器：紫外检测器

色谱柱：Venusil XBP C18(4.6 X 250mm，5ul)

V9520525CK0043
检测波长：205nm

流动相：乙腈-水(90：10)

流速：1.0ml/min

柱温：30℃

进样量：10ul
对照品色谱图：



对照品色谱图精密度比较：

供试品色谱图：



供试品色谱图精密度比较：


经计算该药材中齐墩果酸、常春藤皂苷元含量分别为4.557%、2.816%，含量很高。

通过以上色谱图我们可以看出该检测具有色谱峰形漂亮，分离度好，精密度高，检测时间短等多种优点。检测结果表明该方法检测该药材中齐墩果酸、常春藤皂苷元含量准确、快捷、可靠，操作简单、方便、易行。

结论是该方法非常适合该药材中齐墩果酸、常春藤皂苷元含量检测，并可作为相关检测的参考方法。