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【讨论】降低有机相比例，会造成出峰顺序改变吗？

液相色谱（LC）

  • 近日用液相测水产品中的四种嘌呤，先走的四个单标，想确定各个保留时间。开始流动相是5%的甲醇和95%的盐相，流速1ml/min。发现有两个峰分不开，于是将甲醇降低到3%，流速降到0.8，希望洗脱慢一些，可以分的好一些。确实四个峰分都分开了。但是在前一个条件下第一个出峰的物质在第二个条件下变成第三个出峰了。
    我一直以为降低流速，降低有机相比例，极性增大，只是出峰变慢，洗脱慢一些。怎么连出峰顺序也改变了？？
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  • 该帖子已被版主-夏天的雪加2积分，加2经验;加分理由:鼓励发帖
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    +关注 私聊

  • 夏天的雪

    第1楼2015/01/06

    应助达人

    常用改变流动相中有机相比例的方法改善分离，但是出峰顺序改变的现象不多见

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  • doublexue

    第2楼2015/01/06

    是的，常用的方法，很少遇到这样峰顺序会变的，虽然不影响检测，还是比较困惑

    夏天的雪(bingwang228) 发表:常用改变流动相中有机相比例的方法改善分离，但是出峰顺序改变的现象不多见

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  • 老多_小多

    第3楼2015/01/06

    有个别的会变的，不多见而已

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  • weed2008

    第4楼2015/01/07

    正常的吧 我们也遇到过

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  • dywzqbx

    第5楼2015/01/07

    应助达人

    没见过，涨姿势了

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  • nixiaolong

    第6楼2015/01/08

    这个现象是有的，楼主还是比较细心的，有时候忽略这个问题容易发生误判

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  • doublexue

    第7楼2015/01/08

    是的，大意一点的话，直接用混标的就可能会出错了

    nixiaolong(nixiaolong) 发表:这个现象是有的，楼主还是比较细心的，有时候忽略这个问题容易发生误判

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  • 浪淘沙隐

    第8楼2015/01/08

    我最近也碰到了这种情况，我也挺纳闷的，但是我想可能是某些物质对于有机相特别敏感，虽然我们只改变了一点点比例，但它们的保留发生了大的变化。

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  • 冰块

    第9楼2015/01/09

    是少见的现象，不过你的水相含有盐估计也有pH值的调整，那么在分离可离子化的样品时这种现象会比纯粹的有机相和水相的梯度多一些。

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  • doublexue

    第10楼2015/01/09

    有道理啊，我现在也怀疑是pH造成的

    冰块(burningsnow) 发表:是少见的现象，不过你的水相含有盐估计也有pH值的调整，那么在分离可离子化的样品时这种现象会比纯粹的有机相和水相的梯度多一些。

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