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基线怎么会是这个样子?

液相色谱(LC)


  • 色谱柱:Waters Xbridge 4.6*250mm,5um
    流动相:A:20mM (NH4)2HPO4 (氨水调pH8.5)-MeOH=85:15
    B:ACN
    梯度:时间 0 10 20 30 35
    A 100 80 50 35 35
    B 0 20 50 65 65
    怎么解决?我曾用异丙醇冲洗过整个系统,但还是如此,换了柱子和仪器也是一样
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  • wajer

    第1楼2015/03/16

    应助达人

    等度跑基线,基线也会漂移这么严重?

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  • huht3000

    第2楼2015/03/16

    wajer(anwiner) 发表:等度跑基线,基线也会漂移这么严重?
    等度没试过,怎么个等度,跟乙腈随便一个比例走等度吗?

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  • wajer

    第3楼2015/03/16

    应助达人

    你这个方法是新摸索的?等度的意思是不改变流动相的比例,然后看看基线是否漂移得那么严重

    huht3000(huht3000) 发表:

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  • 一片枫叶

    第4楼2015/03/16

    应助达人

    在整个过程中,存在着极性的突变,吸光度突变。
    在20分钟以前,流动相主要是甲醇的缓冲盐,当乙腈逐渐混入时,由于在此波长下,乙腈的吸光度低于流动相的紫外吸收本底,因此出现了波动峰和往下漂移。
    20分钟以后,流动相的主要成分为乙腈,那么,甲醇的缓冲盐即变为在此波长和紫外吸收本底下的杂质,由于甲醇在此流动相下,紫外吸收不同,便出现了甲醇缓冲盐的波动峰。
    这种方式好像是不会出现基线稳定的。

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  • wajer

    第5楼2015/03/16

    应助达人

    虽然我不懂,但是分析得有条有理

    一片枫叶(v2960432) 发表:在整个过程中,存在着极性的突变,吸光度突变。
    在20分钟以前,流动相主要是甲醇的缓冲盐,当乙腈逐渐混入时,由于在此波长下,乙腈的吸光度低于流动相的紫外吸收本底,因此出现了波动峰和往下漂移。
    20分钟以后,流动相的主要成分为乙腈,那么,甲醇的缓冲盐即变为在此波长和紫外吸收本底下的杂质,由于甲醇在此流动相下,紫外吸收不同,便出现了甲醇缓冲盐的波动峰。
    这种方式好像是不会出现基线稳定的。

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  • 一片枫叶

    第6楼2015/03/16

    应助达人

    也可能有不足之处,有待于进一步讨论

    wajer(anwiner) 发表: 虽然我不懂,但是分析得有条有理

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  • lostking2008

    第7楼2015/03/17

    如果试剂纯度没有问题,检测器波长可能不是最佳。

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  • 夏天的雪

    第8楼2015/03/17

    应助达人

    漂移的比较厉害,应该是走梯度的原因,继续优化色谱条件吧

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  • huht3000

    第9楼2015/03/17

    谢谢各位的解释,我再试试不用甲醇的条件吧,估计这个条件想走好不容易

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  • 一片枫叶

    第10楼2015/03/17

    应助达人

    如果选梯度洗脱的话最好选同种有机溶剂不同浓度的梯度洗脱,这样可能基线比较容易稳定。

    huht3000(huht3000) 发表:谢谢各位的解释,我再试试不用甲醇的条件吧,估计这个条件想走好不容易

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