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基线怎么会是这个样子？

huht3000

2015/03/16

液相色谱（LC）

色谱柱：Waters Xbridge 4.6*250mm,5um
流动相：A：20mM (NH4)2HPO4 (氨水调pH8.5）-MeOH=85：15
B：ACN
梯度：时间 0 10 20 30 35
A 100 80 50 35 35
B 0 20 50 65 65
怎么解决？我曾用异丙醇冲洗过整个系统，但还是如此，换了柱子和仪器也是一样

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wajer

第1楼2015/03/16

应助达人

等度跑基线，基线也会漂移这么严重？

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huht3000

第2楼2015/03/16

wajer(anwiner) 发表:等度跑基线，基线也会漂移这么严重？
等度没试过，怎么个等度，跟乙腈随便一个比例走等度吗？

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wajer

第3楼2015/03/16

应助达人

你这个方法是新摸索的？等度的意思是不改变流动相的比例，然后看看基线是否漂移得那么严重
huht3000(huht3000) 发表:

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一片枫叶

第4楼2015/03/16

应助达人

在整个过程中，存在着极性的突变，吸光度突变。
在20分钟以前，流动相主要是甲醇的缓冲盐，当乙腈逐渐混入时，由于在此波长下，乙腈的吸光度低于流动相的紫外吸收本底，因此出现了波动峰和往下漂移。
20分钟以后，流动相的主要成分为乙腈，那么，甲醇的缓冲盐即变为在此波长和紫外吸收本底下的杂质，由于甲醇在此流动相下，紫外吸收不同，便出现了甲醇缓冲盐的波动峰。
这种方式好像是不会出现基线稳定的。

1

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wajer

第5楼2015/03/16

应助达人

虽然我不懂，但是分析得有条有理
一片枫叶(v2960432) 发表:在整个过程中，存在着极性的突变，吸光度突变。
在20分钟以前，流动相主要是甲醇的缓冲盐，当乙腈逐渐混入时，由于在此波长下，乙腈的吸光度低于流动相的紫外吸收本底，因此出现了波动峰和往下漂移。
20分钟以后，流动相的主要成分为乙腈，那么，甲醇的缓冲盐即变为在此波长和紫外吸收本底下的杂质，由于甲醇在此流动相下，紫外吸收不同，便出现了甲醇缓冲盐的波动峰。
这种方式好像是不会出现基线稳定的。

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一片枫叶

第6楼2015/03/16

应助达人

也可能有不足之处，有待于进一步讨论
wajer(anwiner) 发表: 虽然我不懂，但是分析得有条有理

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lostking2008

第7楼2015/03/17

如果试剂纯度没有问题，检测器波长可能不是最佳。

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夏天的雪

第8楼2015/03/17

应助达人

漂移的比较厉害，应该是走梯度的原因，继续优化色谱条件吧

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huht3000

第9楼2015/03/17

谢谢各位的解释，我再试试不用甲醇的条件吧，估计这个条件想走好不容易

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一片枫叶

第10楼2015/03/17

应助达人

如果选梯度洗脱的话最好选同种有机溶剂不同浓度的梯度洗脱，这样可能基线比较容易稳定。
huht3000(huht3000) 发表:谢谢各位的解释，我再试试不用甲醇的条件吧，估计这个条件想走好不容易

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