液相色谱(LC)
老多_小多
第1楼2015/04/23
快速液相吗,出峰这么快
一片枫叶
第2楼2015/04/23
被测物的极性可能相对较大,100%的甲醇比90%的甲醇极性较弱,洗脱非极性及弱极性被测物的能力较强,而对于极性较强的被测物,其洗脱能力就相对较弱了,所以,纯甲醇反而会延迟极性较大的被测物的出峰时间。本人的见解,不一定正确,只作参考。
jsdengxiao
第3楼2015/04/24
第一个问题,更换仪器所有条件都一样,那就是一起问题了,你是用的在线混合的吗,你试下自己配好的9:1的试剂单通道跑跑看,是HPLC吗,这个出峰有点快啊,感觉没保留,可以改下比例,没保留的时候进样量太大、样品溶解不合适都会有保留时间飘;第二个问题C18柱有机相比例增大肯定洗脱更快的,包括极性的物质,如果9:1时1.58min,100%甲醇1.28min,这个就合理了,混合阀的可能性大
长江七号
第4楼2015/04/24
用的是2.1mm内径的色谱柱,填料还是5um
第5楼2015/04/24
是泵后在线混合的,今天试了把两个泵都换成甲醇,冲洗了很长时间以后,然后两泵混合等度洗脱,不管A泵和B泵换成多少比例,都与单泵纯甲醇的保留时间1.29min是一致的。最后再将A泵换回超纯水,试了下90%甲醇+10%水,连续6针的保留时间都保持在1.50min,这个时间从理论上来说就比较合理了。因此判断可能是A泵或者混合器部分的管路有污染导致两泵混合不均匀,必须用有机相冲洗才能排除污染。
浪淘沙隐
第6楼2015/04/24
这个保留太弱了,根本不好判断,把流动相中的甲醇减小比例再说吧。
武灵
第7楼2015/04/24
你9:1的 柱压能到多少?多长柱子啊?
第8楼2015/04/25
150mm*2.1mm*5um的C18柱子0.4mL/min的流速,柱温35℃,柱压84bar左右
第9楼2015/04/26
哦,谢谢。
夏天的雪
第10楼2015/04/26
这么短的时间出峰,保留太弱,仪器、色谱柱即使完全相同,管路长度、连接也会有差别,稍微有些差别应该是正常的。前面保留时间为0.78min,也怀疑是泵或者在线混合器受污染引起的
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