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色谱柱参数对分离效果的影响

液相色谱(LC)

  • 内径,柱长,填料类型,填料粒径是色谱柱的根本。
    分析柱孔径一般为80~100埃(*0.1nm),也就大约是0.01um,远小于一般滤膜0.45 um,这样的话难道不会堵塞色谱柱么?
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  • 一片枫叶

    第1楼2015/04/26

    应助达人

    这两个帖子可能有助于找到问题的答案。
    主题:【讨论】提问帖(5.17)色谱柱填料的孔径,对样品的分析分离有什么影响(答案已出) 作者:wubin102628
    网址:http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120517/4038201/index_1.shtml
    主题:【求助】色谱柱的孔径 作者:ssgrl
    网址:http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20070517/840018/index_1.shtml

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  • 一片枫叶

    第2楼2015/04/26

    应助达人

    假设:色谱柱填料为规则的均匀的球形填料,其粒径假设为D,流动相含的颗粒也为圆形颗粒,其粒径假设为d,
    那么:通过填料空隙的流动相的颗粒孔径d与填料粒径D,通过平面几何推算有下列关系:

    根据上述公式,可以算出各种不同的填料粒径所对应的孔径的大小。
    如果,填料的粒径为D=4um,那么,其孔径只有d=0.62um,即时使用0.45um的滤膜过滤l流动相,也不会堵塞色谱柱的。

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  • 夏天的雪

    第3楼2015/04/26

    应助达人

    学习了,非常清晰的解释

    一片枫叶(v2960432) 发表:假设:色谱柱填料为规则的均匀的球形填料,其粒径假设为D,流动相含的颗粒也为圆形颗粒,其粒径假设为d,
    那么:通过填料空隙的流动相的颗粒孔径d与填料粒径D,通过平面几何推算有下列关系:

    根据上述公式,可以算出各种不同的填料粒径所对应的孔径的大小。
    如果,填料的粒径为D=4um,那么,其孔径只有d=0.62um,即时使用0.45um的滤膜过滤l流动相,也不会堵塞色谱柱的。

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  • 夏天的雪

    第4楼2015/04/26

    应助达人

    虽然理论上过完滤膜后的颗粒杂质不会在填料孔径中堆积,但是如果产生一些化学键和或者较强的吸附,时间久了也会形成交通不畅,引起压力增加的。另外,如果是缓冲盐或者样品在色谱柱内析出,也会出现堵塞。

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  • 一片枫叶

    第5楼2015/04/26

    应助达人

    您谦虚了,相互学习!低于3um的填料粒径,如果再用0.45um的滤膜过滤,就要考虑色谱柱的堵塞问题了。

    夏天的雪(bingwang228) 发表: 学习了,非常清晰的解释

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  • 又又1990

    第6楼2015/04/26

    哇塞,都上升到原理图了。话说填料都是规整填料吗?

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  • 一片枫叶

    第7楼2015/04/26

    应助达人

    让又又见笑了,这个只是理想化的推理,与实际是有差距的,不过理想化的条件下行不通,实际情况下就更行不通了。

    又又1990(v2984502) 发表:哇塞,都上升到原理图了。话说填料都是规整填料吗?

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  • 一片枫叶

    第8楼2015/04/26

    应助达人

    从色谱柱筛板的选择来看,也是低于色谱柱填料颗粒之间的孔径的。

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  • 又又1990

    第9楼2015/04/26

    哈哈,先从原理上说明可行性 ,很厉害啦!

    一片枫叶(v2960432) 发表: 让又又见笑了,这个只是理想化的推理,与实际是有差距的,不过理想化的条件下行不通,实际情况下就更行不通了。

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  • 一片枫叶

    第10楼2015/04/26

    应助达人

    您过奖了,还有很多知识向您请教,望多关注指导!

    又又1990(v2984502) 发表: 哈哈,先从原理上说明可行性 ,很厉害啦!

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