仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
1
收藏
1
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
生命科学仪器
>
生命科学仪器综合讨论
>
帖子详情
生化分析仪酶测试不准确原因
又又1990
2015/05/28
私聊
生命科学仪器综合讨论
在生化分析测量中,酶的测定比较复杂,要求条件较高,测试比较困难。一般生化分析仪只要酶的测定准确,重复性好,其它项目的测定一般都会没有问题。就生化分析仪酶分析中常见的测试不准确、重复性差的几点原因,跟版友们分享。
生化分析仪酶的测定一般用动力学法进行测试,其原理是在酶反应的最适条件下,用物理、化学或酶促反应的分析方法,在反应速度恒定期(零级反应期)来连续观察和记录一定反应时间内底物或产物量的变化,以单位时间酶反应初速度计算出酶活力的大小和代谢物的浓度。零级反应期,指反应速度与底物浓度的零次方成正比,也就是与底物浓度无关。在零级反应期期间整个反应过程中,反应物可以匀速地生成某个产物,导致被测溶液在某一波长下吸光度均匀地减小或增加,减小或增加的速度(ΔA/min)与被测物的活性或浓度成正比。
因此GPT的测试结果与以下几点有关:
1、340nm为波长低端,能量较低,同时340nm滤光片使用较多,易老化。所以波长漂移不准,半宽度变化都会影响测量的准确度和重复性。
2、动态法测试有延迟时间,测试时间要求。延迟时间在动态法中为预反应时间,测试时间在动态法中为测试的总时间。零级动力学法是针对特定时间段而言的,酶反应刚启动时反应比较复杂,杂反应较多,必需经过一段延迟时间才能进入稳定反应期,各试剂商对这两段时间有严格规定。所以动态法测试一般温度在37℃,延迟时间不少于15秒为好。
3、对于参数的输入应按试剂要求输入其给定值,一般试剂商在试剂盒说明书中给予说明。
4、反应温度。
5、测试空白要准确。
6、吸液量的大小直接影响交叉污染和测量的重复性,建议测试污染性大的物质试剂量应相应增加。一般应大于400μl,一般项目为500μl即可。
7、测试不准确、重复性差从操作上看主要有:仪器本身原因如比色杯中有气泡;光源灯老化;光源电压不稳;340nm滤光片性能变差,透射性变小;波长不准确等有关。一般检查液路接口是否松动漏气,更换光源灯泡和340nm滤光片即可解决。至于电路问题,加热元件损坏,温度不受控的问题只能由工程师解决。
总之酶的测定影响准确度的因素很多,只要认真操作,综合分析影响测定的各项因素,认真分析,酶测定的问题不难解决的。只要试剂、样品准确,保存得当,样品预处理仔细,仪器经常维护、保养,认真操作,问题会自行解决。
精
该帖子已被
管理者-检测老王
设置为精华,下面是奖励记录:加10积分,加5声望
相关话题
1
五颜六色的采血管
2
人用肝素化采血管的质量控制
3
生气与疝气有关吗
4
硅胶假体-乳房植入物的安全性
5
PCR扩增仪常见问题汇总
+关注
私聊
又又1990
第1楼
2015/05/29
没有小伙伴儿们敢兴趣吗
0
发表回复
近期热榜
赛默飞实验室产品焕新计划有奖调研!
【七月征文】不一YOUNG实验“猿”
报名开启:ICS2024第十三届光谱网络会议!
推荐收藏!盘点中药材及饮片检测解决方案
热门活动
甄选国优仪器,助推设备更新
采购咨询618活动:1000元奖励等你拿
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
平板细胞克隆形成试验
分享
2012/06/15
蛋白质的分离纯化——不同材料的预处理方法
资料
2015/02/12
【电子书】生物芯片
2006/07/19
HRP标记的二抗能做免疫荧光吗?
资料
2024/01/29
转基因生物可将二氧化碳转化异丁醇
分享
2012/12/17
【发酵工程】与【生物化工】
分享
2012/04/21
【分享】基因芯片的制备
2007/04/19
【分享】出现片状拖带或涂抹带
2007/01/03
【我们不一YOUNG】第一次做生物实验
原创
2024/07/08
【我们不一YOUNG】蛋白质浓度测定方法大全
原创
2024/07/06
【我们不一YOUNG】HTS酶抑制剂筛选的流程介绍
分享
2024/07/05
太空微重力环境下癌症药物研究系统进口航空航天随机定位微重力模拟仪AJ001X
分享
2024/07/05
弱光成像或体内发光实验Atik TE科研制冷CCD相机
原创
2024/07/05
【我们不一YOUNG】结缘仪器,一起结缘,与仪器信息网一起成长
原创
2024/07/01
心血管检测仪打开后出现ch375dll.dll电脑丢失怎么办
已应助
2024/07/01
出售贝克曼DXC800生化分析系统
原创
2024/06/21
检测报告一定要有判定结果吗?
求助
2024/07/01
气相FID重现性不好原因
求助
2024/07/01
求助安捷伦GC7890B,EPC无响应解决办法
求助
2024/07/01
‘有奖问答’对错题’:用抽样方案(30,0)对产品批进行连续验收,当批不合格品率为1%时,方案的接收概率为73.97%,则平均检出质量为( )。
讨论
2024/07/05
HJ1332便携非甲实际应用问题
讨论
2024/07/01
如何做好体系工作?
分享
2024/07/01
多人主检的报告,检测审核应该怎么签字
求助
2024/07/05
EI源的灯丝镉厂家通用吗?
求助
2024/07/03
头孢硫醚杂质峰面积不稳定,主峰和其他杂质峰稳定????
已应助
2015/05/28
岛津GC2014C SPL完全不分流进样和WBI直接进样有什么区别
已应助
2015/05/28
“离子水”“富氧水”等名称将消失
分享
2015/05/28
实验室的害虫
讨论
2015/05/28
求助文献5篇
悬赏帖
2015/05/28
生姜洗头发
讨论
2015/05/28
GCMS仪器参数设置的重要性
分享
2015/05/28
如何将GC的灵敏度提高1-2个数量级?
分享
2015/05/28
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...