UPLC梯度洗脱重现性极差，已从多方面排查，求各位师兄指点！

如果你是做这个不行，还可以考虑换另外一个梯度方法来验证，如果重现性不好，肯定是仪器有问题了，找原因也比较麻烦，就像你说的阀，一般都是工程师才判断的出来

今天把检测器用水反冲了下，临下班了看了看灯能量，还是只有55%。
明天打算用异丙醇再冲冲，争取把灯能量这个问题解决。
今天又打电话给售后了，也跟工程师反应了梯度洗脱没峰，等度洗脱有峰，工程师表示也百思不得其解，
我说我现在报修都不知道保修哪个部分啊，工程师说你再折腾折腾，实在不行让工程师上门排查。
我会把每日排查进度都放上来跟大家交流，希望能够尽快把仪器问题解决，正常实验。

应助达人

进样器不灵活，出现卡主的情况，仅属于个人猜想，可能性极小。简单样品连续6~10针测定峰面积RSD，或者是走一个自动进样器线性检测，或者是测定进样器精度，http://bbs.instrument.com.cn/topic/4838369，可做参考。
比较想知道你最后会怎么解决，期待你的更新

你的液相条件是什么梯度，流动相是否加了缓冲盐？初始水相比例97%，平衡时间要稍长一些。注意观察系统压力，每一针的平衡时的压力、梯度运行时的压力变化。若每一针的压力变化一样，说明泵没有问题。不连色谱柱，直接进样几次，测试进样阀和检测器是否有问题。重新配置流动相，看是否是流动相的问题。逐一排查一下。

各位好，我又来了。
今天周日，厂里加班，有空我又试了试机子。
楼上有位师兄说测测RSD，我其实上次测过荧光的RSD，0.8%，
两个检测器是串联使用，梯度洗脱如果有问题的话那荧光的出峰时间应该会有变化，可是现在没有这个现象。
上周五我做色素的时候同时也用UPLC试了试，
发现色素紫外能够出峰，第一针峰型很好。可以排除检测器问题，灯能量不行照样能出峰。
后来发现一个问题，
色素为4个物质混标，柠檬黄、靛蓝、日落黄、诱惑红（出风顺序）
同一小瓶，重复进样，
日落黄跟诱惑红出峰较稳定，前两个色素柠檬黄、日落黄经常容易搅在一起
有些怀疑泵输液系统存在问题，还需继续排查。
初步怀疑比例阀，可是如果比例阀有问题那为何荧光的出峰时间及峰面积都具有极好重现性？

我也是用UPLC H Class型仪器，测氨基酸，也出现了这种情况，同样的样品、同样的洗脱梯度，基本只有一个出峰，其他几次试的都是没峰的

应助达人

其他项目是否正常，如果正常，考虑衍生问题

恩，谢谢。
流动相是换过的，柱子也洗过，用其他柱子测定其他样品可以正常出峰。
柱子昨天才洗过的，今天准备再试一下，如果不行的话，只能重新衍生样品，主要衍生剂的有时间限制，比较麻烦，
还有就是仪器是PDA检测器，已经超时了，但是还在继续用，这两天一直有通讯失败的现象。不知道和这个有没有关系啊？